论文部分内容阅读
⑴采用中心复合设计（central composite circumscribed design, CCC）实验设计法研究了温度、盐度两个环境因子对马氏珠母贝稚贝生长与存活的影响。采用方差分析（ANOVA）、决定系数等对实验所得回归方程模型进行显著性及拟合度检验，同时采用响应曲面分析法及基于响应曲面基础之上的满意度函数法确立了生长与存活的最佳温度、盐度组合。以温度、盐度两个因子为自变量，以马氏珠母贝稚贝壳高瞬时生长率、累积生长率及存活率为因变量，建立的二次回归方程模型如下：IGR=-151.4289+3.7791T+7.5142S+0.0079T×S-0.0692T2-0.1294S2AGR=-881.387+18.5432T+46.9178S+0.0532T×S-0.3542T2-0.8145S2SR=-697.191+24.8590T+29.2500S+0.0623T×S-0.4637T2-0.5212S2以上模型决定系数分别达到，95.56%、97.67%、94.59%，说明瞬时生长率、累积生长率及存活率的回归方程模型均呈现显著水平且拟合度较高，能够真实的反应实际情况并能用于不同温度、盐度组合下生长与存活的预测。在马氏珠母贝稚贝生长过程中以及存活中温度、盐度在一定的范围内的互作效应不显著，其中温度效应较为明显。优化结果显示最佳温度、盐度组合为28.63°C，29.75，在此最优条件下模型预测的瞬时生长率、累积生长率和存活率分别达到15.76%.d-1、79.35μm.d-1和96.46%，满意度98%。⑵采用CCF设计和响应曲面分析法在实验室条件下研究了不同的温度（°C）、盐度（S）和饵料密度(cells.L-1)组合下对马氏珠母贝滤水、摄食率的联合影响，确定了马氏珠母贝最佳生长温度、盐度和饵料密度组合。设定温度范围16-34°C，盐度范围20-44，饵料密度范围0.50×102-3.50×102cells.L-1。建立了温度、盐度和饵料密度对马氏珠母贝滤水率、摄食率的定量关系。结果表明：温度一次效应、二次效应对滤水率影响极显著（P<0.01）；盐度一次效应对滤水率影响显著（P<0.05）；盐度二次效应对滤水率影响极显著（P<0.01）；饵料密度一次效应对滤水率影响不显著（P>0.05）；饵料密度二次效应对滤水率影响极显著（P<0.01）；温度和饵料密度对滤水率的互做效应显著（P<0.05）；温度和盐度、盐度和饵料密度对滤水率的互做效应不显著（P>0.05）。温度一次效应对摄食率影响显著（P<0.05）；温度二次效应对摄食率影响极显著（P<0.01）；盐度一次效应、二次效应对摄食率影响极显著（P<0.01）；饵料密度一次效应、二次效应对摄食率影响极显著（P<0.01）；温度和饵料密度对摄食率的互作效应显著（P<0.05）；温度和盐度、盐度和饵料密度对摄食率的互作效应不显著（P>0.05）。利用响应曲面法对滤水率和摄食率同时优化，得到在适宜的温度、盐度和饵料密度范围内两个响应变量呈峰值变化，在温度28.61°C，盐度31.18，饵料密度27.36×10cells.L-1时，滤水率13.46×10-2L.h-1，摄食率15.77×106cells.h-1同时达到最大值，满意度达到86%。对实验数据进行二次多元回归拟合，根据实际值得到滤水率、摄食率对温度、盐度和饵料密度的二次多项回归方程如下：CR=-407.2457+13.9660T+16.3580S+11.4731A+0.0331T×S+0.0705T×A+0.0179S×A-0.2958T2-0.2851S2-0.3503A2FR=-36.0771+1.5008T+1.0601S+1.4321A-0.0017T×S+0.0059T×A-0.0026S×A-0.0287T2-0.0173S2-0.0316A2滤水率模型的决定系数99.56%，摄食率模型的决定系数99.53%，表明模型的拟合度极高，可用于预测滤水率和摄食率的最优值，研究结果为马氏珠母贝人工养殖提供理论基础。⑶采用复合设计和响应曲面分析法在实验室条件下研究了不同温度（°C）、盐度（S）组合下对马氏珠母贝（P. martensii）鳃、闭壳肌、外套膜Hsp70基因表达量的联合效应并建立了模型。采用方差分析（ANOVA）和决定系数对实验所得回归方程模型进行显著性及拟合度检验。设定温度范围16-40°C，盐度范围10-50。结果表明：温度的一次效应对鳃、闭壳肌、外套膜Hsp70基因表达量影响显著（P<0.05），盐度的一次效应对鳃、闭壳肌、外套膜Hsp70基因表达量无显著影响（P>0.05）；温度、盐度二次效应对鳃、闭壳肌、外套膜Hsp70基因表达量影响显著（P<0.05），温度、盐度之间的互作效应对鳃、闭壳肌、外套膜Hsp70基因表达量无显著影响（P>0.05）。采用响应曲面法对实验结果优化，得到在适宜的温度、盐度范围内两个响应变量呈峰值变化，在温度26.78°C、盐度29.33时，Hsp70表达量在鳃、闭壳肌、外套膜中分别达到最小值0.5276、0.9821、0.9499，满意度达到98%。以温度、盐度两个因子为自变量，以马氏珠母贝鳃、闭壳肌、外套膜Hsp70表达量为因变量，建立的Hsp70基因表达量的二次回归方程模型为：GHsp70=3.0957-0.1269T-0.0592S-0.0001T×S+0.0024T2+0.0011S2AHsp70=3.0398-0.0910T-0.0454S+0.0001T×S+0.0014T2+0.0006S2MHSP70=2.5830-0.0738T-0.0362S+1.04T×S+0.0013T2+0.0006S2建立Hsp70基因表达量模型的决定系数分别为98.69%、97.53%、98.69%，表明模型的拟合度极高，模型选择恰当，可用于预测Hsp70基因表达量的变化值。实验结果为马氏珠母贝Hsp70基因的上调表达维持细胞内环境稳定以及提高马氏珠母贝抗逆性提供了理论条件。