药用植物刺山柑ISSR遗传多样性及凝胶膏剂的研究

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目的:1.对刺山柑(Capparis spinosa L.)药材ISSR(inter-simple sequence repeat,简单重复序列间区)遗传多样性进行考察;2.对中药刺山柑凝胶膏剂制备工艺的初步研究。方法:1. ISSR-PCR引物的筛选,从100条ISSR通用引物中筛选出稳定和可重复的反应引物并采用单因素实验确定反应体系,刺山柑药材的ISSR-PCR扩增,并利用POPGENE及MEGE软件进行遗传多样性分析及居群聚类分析;2.以芦丁含量和醇浸出物得率为指标,通过单因素实验优化刺山柑药材的提取工艺;以剥离强度及物理性状为指标,筛选基质并优化其制剂工艺,通过透皮实验筛选最优透皮促透剂。结果:1.10条引物共扩增出94位点,其中多态性位点为98.94%;在物种水平上,有效等位基因数Ne为1.4883,Nei’s基因多样性H为0.2874,Shannon信息指数I为0.4379,多态位点百分率PPB=98.94;基因流Nm为0.7093,居群间基因分化系数GST为0.4134;聚类分析结果显示,新疆省的10个刺山柑居群聚为两类;2.刺山柑最佳提取工艺为:料液比为1﹕8(药材:90%乙醇),提取次数为3次,提取时间为1小时/次;刺山柑凝胶膏剂最佳基质配比:K-30﹕CMC-Na﹕甘油﹕NP-700﹕甘羟铝﹕吐温-80=2﹕0.2﹕15﹕3﹕0.2﹕1;凝胶膏剂各项检查指标合格;20mg·g-1氮酮促渗效果较好,其促渗倍数为1.2575倍,芦丁的透皮速率常数为5.4457μg·cm-2·h-1。结论:1. ISSR分子标记可反应刺山柑药材的遗传多样性;2.刺山柑凝胶膏剂的研究为传统中药材新剂型的开发提供了理论基础与实践经验。
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