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目的研究表明肠道菌群参与了大肠癌的发生发展,具核梭杆菌（Fusobacterium nucleatum,F.nucleatum）作为一种机会性致病菌,近年来,大量文献证实F.nucleatum不仅会导致大肠癌,还会引起化疗耐药的发生,而四君子汤在调节肠道菌群方面具有较大的优势。鉴于此,本研究采用高通量测序技术,对比中药联合化疗组与化疗组、肠癌组、健康组肠道菌群的丰富度和多样性,实时荧光定量PCR测定F.nucleatum的丰度,以探求四君子汤联合化疗对大肠癌患者F.nucleatum丰度及肠道菌群丰富度和多样性的影响。同时观察大肠癌患者化疗毒副反应的发生情况和脾虚症状的变化情况,以评估四君子汤在大肠癌治疗中的作用。方法本研究采集符合入组标准的大肠癌脾虚证患者与体检健康人群的粪便,A组为体检健康人群25例,大肠癌患者（脾虚证）分为B、C、D三组,B组为肠癌组25例（初诊患者）,C组为化疗的大肠癌患者30例,D组为中药联合化疗的大肠癌患者30例。提取每份样本中的细菌总DNA,根据16Sr DNA V3-V4区设计引物进行扩增,使用Illumina Miseq平台予以高通量测序,通过生物信息分析软件对测序结果进行分析,进而得到样品的物种信息,分析对比四组肠道菌群丰富度、多样性的差异,另采用实时荧光定量PCR技术以获取四组F.nucleatum的丰度,比较D中药联合化疗组F.nucleatum的丰度与其它三组有无显著差异,同时观察患者治疗前后脾虚症状变化情况、治疗期间出现的化疗毒副反应,以探求中药复方四君子汤联合化疗对肠癌患者肠道菌群的影响,以及对F.nucleatum丰度的影响,评估四君子汤在大肠癌治疗中的作用。结果1.Alpha多样性分析发现:四组经两两对比,A健康组与B肠癌组的Chao指数、Ace指数对比具有统计学意义（P<0.01）,A健康组与C化疗组对比,也具有统计学意义（P<0.05）,且健康组肠道菌群的丰富度高于肠癌组、化疗组。D中药联合化疗组与B肠癌组对比具有统计学意义（P<0.01）,D中药联合化疗组、C化疗组两者比较也有统计学意义（P<0.05）,中药联合化疗组的菌群丰富度高于肠癌组、化疗组,说明经四君子汤联合化疗,可以明显提高大肠癌患者肠道菌群丰富度。虽然四组样本的shanno指数、simpson指数无统计学意义（P>0.05）,提示各组之间群落多样性无显著差异,但中药联合化疗组的肠道菌群多样性与健康人接近,说明经四君子汤联合化疗可以使大肠癌患者肠道菌群多样性趋向正常。2.Beta多样性分析发现:A健康组、B肠癌组、C化疗组、D中药联合化疗组四组的组间差异大于组内差异,但无统计学意义（P>0.05）,考虑可能与入组例数较少有关。3.实时荧光定量PCR结果显示,F.nucleatum的丰度在四组中由高到低的顺序依次是:B肠癌组（5.81±0.29）、C化疗组（5.45±0.51）、A健康组（5.05±0.60）、D中药联合化疗组（4.59±0.28）。经两两对比,A健康组和B肠癌组比较,有统计学意义（P<0.01）,肠癌组具核梭杆菌丰度高于健康组。B肠癌组、C化疗组分别与D中药联合化疗组比较,皆有统计学意义（P<0.01）,中药联合化疗组具核梭杆菌丰度明显低于肠癌组、化疗组。说明患者化疗期间口服四君子汤治疗,可以明显降低肠道具核梭杆菌的丰度。A健康组与C化疗组比较,A健康组与D中药联合化疗组比较,B肠癌组与C化疗组比较,均无统计学意义（P>0.05）。4.采用中医症状积分法评估了C化疗组与D中药联合化疗组脾虚症状的改善情况,中药联合化疗组有效率为86.67%,在治疗前、治疗后中医症状总积分分别为11.93±2.59、7.17±1.51,具有统计学意义（P<0.05）。化疗组有效率为30.00%,在治疗前、治疗后中医症状总积分分别是11.00±1.93、10.00±2.12,无统计学意义（P>0.05）。两治疗组间脾虚症状总积分的比较具有统计学意义（P<0.05）,两治疗组的KPS评分在治疗后都有所提高,C化疗组评分为66.33±5.56,D中药联合化疗组评分为72.33±6.79,两组间对比有统计学意义（P<0.05）,说明四君子汤联合化疗可以明显改善患者脾虚症状,提高患者生活质量。D中药联合化疗组的有效率和稳定率高于C化疗组,但近期客观疗效差异不具有统计学意义（P>0.05）。5.安全性评价方面,C化疗组发生消化道反应和周围神经毒性的例数明显高于D中药联合化疗组,两组间对比具有统计学意义（P<0.05）,而两治疗组间骨髓抑制发生情况无统计学意义（P>0.05）,说明四君子汤能有效减轻化疗的不良反应。治疗后较治疗前对比,两组的肝肾功能均无统计学意义（P>0.05）,说明治疗期间未出现肝肾功损害。结论1.四君子汤联合化疗可以提高大肠癌患者肠道菌群的丰富度,使肠道菌群多样性趋向正常。2.四君子汤联合化疗会抑制致病菌─具核梭杆菌的生长。3.大肠癌患者在化疗期间配合四君子汤治疗可以有效减轻化疗毒副反应（消化道反应、周围神经毒性）,改善患者脾虚症状,提高患者生活质量。