决明方有效成分传递体纳米乳剂制备及其减肥作用机制的实验研究

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目的:结合传统中医药理论和现代新型制药工艺制备决明方有效成分传递体纳米乳剂并建立其有关药学质量评价标准外用观察其对肥胖大鼠体重和脂肪组织脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase, ATGL)和G0/G1期开关基因2(G0/G1switch gene2, G0S2)的蛋白表达的影响,以研究探讨减肥作用的机制方法:1药学实验部分:将决明子等按君臣佐使配成复方中药决明方,经水煮醇提后主要成分为大黄素,采用薄膜分散法将其制备成传递体混悬液,经冰水浴超声并挤压过纳米级微孔滤膜以包封率为考察指标通过正交试验设计优选最佳处方和工艺,并用Zetasizer电位及纳米粒度分析仪测定其ζ电位并分析其纳米粒径大小,用紫外分光光度法测定药物的包封率等药学质量标准后将其按重量比30:3:1加至甘油和羧甲基纤维素钠中研磨混匀,即成决明方有效成分传递体纳米乳剂2动物实验部分:60只雄性SD大鼠随机分为正常对照组10只和造模肥胖组50只,正常对照组喂养普通饲料,造模肥胖组喂养高脂饲料2周后挑选肥胖造模成功大鼠39只按体重分为:肥胖模型组9只,决明方传递体乳剂外用组10只,单纯腹部按摩对照组10只,决明方口服对照组10只分别干预8周,测量大鼠体重内脏脂肪湿重体脂比,检测血脂等血生化指标,HE染色光镜下观测脂肪组织的细胞数量及大小并观察肝脏组织脂肪病变,取附睾脂肪组织Western Blot法测定脂肪组织ATGL G0S2蛋白表达量结果:1药学实验部分:决明方有效成分传递体最佳制备配方为去氧胆酸钠/磷脂1:8,胆固醇/磷脂1:3,维生素E/磷脂1:20,决明方有效成分大黄素药液/磷脂1:6所得决明方传递体混悬液ζ电位-15.11mV,平均粒径为292.2nm,球形圆整,大小均匀,均一稳定在λ max=435nm波长处的吸光度A与药物浓度C(mg/mL)的标准曲线方程为:A=50.485C-0.0913(r=0.9991),测得平均包封率为(69.350.25)%2动物实验部分:与肥胖模型组比较,决明方传递体乳剂外用组大鼠体重内脏脂肪湿重降低(P<0.05),体脂比无差异(P>0.05);高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)增高(P<0.05);HE染色光镜下脂肪细胞直径变小(P<0.05);HE染色光镜观察肝组织脂肪变较轻;脂肪组织ATGL的蛋白表达量增加,G0S2的蛋白表达量降低(P<0.05)结论:采用薄膜分散法制备决明方传递体纳米乳剂处方合理工艺可行,所得传递体带负电,粒径较小且分布均匀,包封率高且稳定性好,切实可行其外用能减轻肝脏脂肪病变,降低外周脂肪含量,升高血清HDL-C水平,并能上调肥胖大鼠脂肪组织ATGL的蛋白表达量,下调G0S2的蛋白表达量,两者间可能存在一定的拮抗作用,从而减轻肥胖大鼠体重
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