在中枢神经系统中，小胶质细胞是对外界刺激反应最迅速的免疫细胞，在急性损伤和慢性疾病中发挥着重要作用。包括ATP在内，多种炎性因子的刺激能使小胶质细胞迅速从静息状态转化成活化状态。活化的小胶质细胞具有活跃的伪足活动，并依赖伪足活动完成包括迁移、吞噬和吞饮在内的各种病理生理活动。　　本实验利用免疫荧光染色、免疫电镜染色，细胞组分分离等技术，发现在ATPγs诱导的小胶质细胞迁移过程中，溶酶体蛋白水解酶Cathepsin D以48kD的未成熟形式被晚期内吞体释放至胞浆，并出现在细胞前沿的板状伪足。药理学和活细胞成像的结果提示，Cathepsin D的这种移位现象可能与溶酶体内Hsp70蛋白介导的溶酶体通透性相关。使用抑制剂或特异性siRNA干扰片段下调Cathepsin D，或使用重组Hsp70蛋白抑制细胞溶酶体通透性，与使用CathepsinD缺失小胶质细胞的实验结果相同，均能有效抑制由ATPγs诱导的小胶质细胞板状伪足活动的维持过程。我们通过免疫共沉淀和蛋白质谱筛选和鉴定CathepsinD的结合蛋白，发现在板状伪足定位的Cathepsin D能够与丝切蛋白酶cofilin发生结合，并以某种形式影响基于磷酸化修饰的cofilin活性调控过程。同时，我们利用细胞松弛素D和Jasplakinolide等药物干预细胞骨架重排过程，并对Cathepsin D缺失的小胶质细胞进行活细胞成像分析，发现在板状伪足部位，进入胞浆的Cathepsin D能够通过影响cofilin参与的微丝骨架的单体G-actin循环，参与伪足活动的维持过程。这些结果表明，溶酶体水解酶Cathepsin D在小胶质细胞受到ATPγs刺激后，以48kD的未成熟形式被晚期内吞体释放至胞浆，并通过干预cofilin磷酸化平衡，参与板状伪足相关的细胞运动的精细调控过程。　　本研究提出，溶酶体酶类能够在细胞受到外界刺激的情况下，能够脱离内吞体-溶酶体系统，进入pH中性的胞浆环境，并通过调节骨架相关蛋白活性，参与细胞骨架重排和细胞运动的精细调节作用。本课题首次从细胞骨架调控角度，阐明了溶酶体酶类对小胶质细胞快速运动过程的维持机制，为免疫细胞的快速运动方式提供了新见解，并为溶酶体对细胞运动精细调控的新功能提供了新的重要证据。