绵羊痒病小鼠模型的病理组织学动态观察

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传染性海绵状脑病是人和动物的一类慢性、致死性、神经性疾病,是牛海绵状脑病、绵羊痒病以及人的克雅氏病、库鲁病等疾病的统称。绵羊痒病是最早发现的TSE,目前认为绵羊痒病引起了疯牛病,并伴随疯牛病,引起了人类的变异性克雅氏病。因此,绵羊痒病发病机制及其在体内增值的研究具有重要的意义。   人工脑内感染小鼠痒病RML、22L毒株,通过小鼠组织切片制备,经蛋白酶K消化、水化高压、单抗孵育和ABC试剂盒显色等步骤分析,建立了一套完整的绵羊痒病小鼠模型病理学检测方法。   人工脑内感染小鼠痒病RML、22L毒株,分别在感染后90d、110d、120d、150d、160d取脑、脾组织,用酶标法进行免疫组织化学检测。结果:人工脑内感染RML毒株感染后90d、110d、120d、150d、160d小鼠脾脏,均存在朊毒体(PrPSc);感染后90d、110d、120d、150d、160d脑组织均未检测到PrPSc。人工脑内感染22L毒株感染后的90d、110d、120d、150d、160d小鼠脾脏均存在PrPSc,感染后90d、110d、120d、150d、160d脑组织均存在PrPSc。随着感染后天数的增加,朊毒体逐渐增多,且朊毒体呈逐渐增大趋势。说明RML、22L毒株的毒力、侵害部位、体内蓄积时间有着明显的不同。   人工脑内感染小鼠痒病RML、22L毒株,待其发病后,取脑、脊髓、脾、肠系膜淋巴结、小肠、大肠、心、肝、肺、肾、肌肉、膀胱等组织按常规方法制备组织切片,脱蜡后进行HE和免疫组织化学(IHC)染色并观察。结果:在感染RML、22L毒株发病小鼠脑、脊髓有空泡变化且空泡呈规则的圆形或椭圆形,周边整齐。心、肝、脾、肺、肾、肌肉、胃、膀胱等组织器官未见明显病理变化。感染RML毒株发病小鼠脑、脾、肠系膜淋巴结、小肠有阳性红色染色颗粒说明有PrPSc存在,脊髓、心、肝、肺、肾、回肠末端、膀胱、肌肉等组织器官未有PrPSc存在。感染22L毒株发病小鼠脑、脊髓、大肠、脾、肠系膜淋巴结见有阳性红色染色颗粒说明有PrPSc存在,心、肝、肺、肾、小肠、膀胱、肌肉等组织器官未见到阳性红色颗粒,未有PrPSc存在。
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