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目的:研究大麻素受体2（CB2受体）激动剂AM1241通过ERK1/2-RSK1信号通路对腹腔注射四氯化碳（CCl4）诱导的小鼠肝纤维化的影响与机制。方法:体内实验:建立小鼠肝纤维化模型（本课题组前期实验已成功建立该模型）:1、将野生型（WT）C57BL/6J小鼠随机分成WT对照组、WT模型组,CB2受体基因敲除(CB2-/-)C57BL/6J小鼠随机分成CB2-/-对照组、CB2-/-模型组,模型组小鼠腹腔注射CCl4（5mg/kg,食用橄榄油稀释）,每周三次,共16周,对照组腹腔注射食用橄榄油。酶法检测各组小鼠血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天门冬氨酸氨基转移酶（AST）含量,对各组小鼠肝组织切片进行HE染色与Masson染色,Western blot检测肝组织α-SMA、TGF-β1、A20、NF-κB、p-NF-κB、TNF-α与IL-6蛋白表达水平,RT-PCR检测TNF-α、IL-6 m RNA水平。2、将WT C57BL/6J小鼠随机分成对照组、模型组、AM1241（3mg/kg）组、AM1241（9mg/kg）组、AM630+AM1241（3mg/kg）组,相同方法建立肝纤维化模型,AM1241（3mg/kg）组、AM1241（9mg/kg）组与AM630+AM1241（3mg/kg）组在每次注射CCl4前1 h分别注射AM1241 3mg/kg、AM1241 9mg/kg和AM630+AM1241各3mg/kg。酶法检测小鼠血清ALT、AST含量,对肝组织切片进行HE染色和Masson染色,Western blot检测肝组织VEGF、c TGF、b FGF、ERK1/2、p-ERK1/2、RSK1、p-RSK1、PPAR-γ与C/EBPβ蛋白表达水平,ELISA检测肝组织匀浆GSH-px、IL-6、IL-1β含量,Real Time-PCR检测PPAR-γ、C/EBPβ、GSH-px、IL-6与IL-1βm RNA水平。体外实验:1、体外进行大鼠肝星状细胞（HSC-T6）的培养,分别给予0、2.5、5、10、15μg/L TGF-β1刺激24 h,Western blot检测各组细胞α-SMA蛋白表达水平;2、对5μg/L TGF-β1刺激的HSC-T6细胞分别给予0、20、40、80、160μmol/L AM1241干预24 h与48 h,设对照组（含HSC-T6细胞的培养基）与空白组（仅为空白培养基）,CCK-8法检测AM1241对HSC-T6细胞增殖的影响,并计算AM1241干预HSC-T6细胞24 h的半抑制浓度（IC50）,Western blot检测AM1241干预24 h后细胞α-SMA、b FGF、caspase-3、cleaved caspase-3与BAX蛋白表达水平;3、对5μg/L TGF-β1刺激的HSC-T6细胞分别给予0、20、30、40、60、80、160μmol/L AM1241干预24 h与48 h,流式细胞术检测AM1241对HSC-T6细胞凋亡的影响;4、设对照组、TGF-β1刺激组、34μmol/L AM1241组（同时给予5μg/L TGF-β1刺激）,分别培养24 h与48 h,Western blot检测细胞α-SMA、cleaved caspase-3、BAX、ERK1/2、p-ERK1/2、RSK1、p-RSK1蛋白表达水平;5、将HSC-T6细胞分为对照组、TGF-β1刺激组、34μmol/L AM1241组、AM630+AM1241组、TBHQ组、TBHQ+AM1241组,除对照组外,余各组给药干预的同时给予5μg/LTGF-β1刺激,培养48 h,Western blot检测细胞ERK1/2、p-ERK1/2蛋白表达水平。结果:体内实验:1、CB2-/-对照组与WT对照组相较,ALT、AST的含量无显著的改变（P>0.05）,HE染色均显示:肝细胞完整,肝组织无炎症反应,Masson染色显示几乎无胶原纤维的产生,肝组织α-SMA、TGF-β1、A20、p-NF-κB、TNF-α与IL-6蛋白表达水平无差异,TNF-α与IL-6 m RNA水平也无显著变化;CB2-/-模型组与WT模型组相比,血清ALT、AST含量明显升高（P<0.05）,HE染色显示肝细胞损伤和炎症反应加重,Masson染色显示产生的胶原纤维增多,肝组织α-SMA、TGF-β1、A20、p-NF-κB、TNF-α与IL-6蛋白表达水平均上升（P<0.05）,TNF-α、IL-6 m RNA水平与蛋白表达水平一致（P<0.05）。2、野生型小鼠模型组与对照组相比:血清ALT、AST含量显著升高（P<0.05）,HE染色显示肝组织出现严重的损伤与炎症反应,Masson染色显示肝组织分泌的胶原纤维显著增多,肝组织VEGF、c TGF、b FGF、p-ERK1/2、p-RSK1、C/EBPβ蛋白表达水平均升高（P<0.05）,PPAR-γ蛋白表达水平和m RNA水平均下降（P<0.05）,GSH-px含量和m RNA水平均降低（P<0.05）,IL-6与IL-1β含量和m RNA水平均升高（P<0.05）;AM1241干预组（3mg/kg、9mg/kg）与模型组相比,ALT、AST的结果明显下降（P<0.05）,HE染色显示肝组织损伤情况与炎症反应均改善,Masson染色显示产生的胶原纤维有所减少,肝组织p-ERK1/2、p-RSK1、C/EBPβ与VEGF、c TGF、b FGF蛋白表达水平均有所降低（P<0.05）,PPAR-γ蛋白表达水平和m RNA水平均升高（P<0.05）,GSH-px含量和m RNA水平均升高（P<0.05）,IL-6与IL-1β含量和m RNA水平均降低（P<0.05）;与AM1241（3mg/kg）组相比,AM630+AM1241（3mg/kg）组均可逆转上述的结果（P<0.05）。体外实验:1、α-SMA蛋白表达水平随着TGF-β1刺激HSC-T6细胞浓度的增加而升高（P<0.05）;2、各组细胞吸光度值（OD值）与AM1241的浓度和处理时间呈负相关（P<0.05）,IC50=34μmol/L;随着AM1241干预HSC-T6细胞的浓度的增加,α-SMA、b FGF蛋白表达水平逐渐降低,cleaved caspase-3、BAX的蛋白表达水平逐渐升高（P<0.05）;3、随着AM1241干预HSC-T6细胞浓度的增加,细胞凋亡率依次升高（P<0.05）,且48 h的细胞凋亡率与相对应浓度的24 h的细胞凋亡率相比均有所升高;4、TGF-β1刺激组与对照组相较,α-SMA蛋白水平有所上升（P<0.05）,与TGF-β1刺激组相比,随着AM1241干预时间的延长,α-SMA、p-ERK1/2、p-RSK1蛋白表达水平递减（P<0.05）;cleaved caspase-3、BAX蛋白表达水平递增（P<0.05）;5、与TGF-β1刺激组相较,34μmol/L AM1241组p-ERK1/2蛋白表达水平有所降低（P<0.05）,与34μmol/L AM1241组相比,AM630+AM1241组与TBHQ+AM1241组均可逆转p-ERK1/2蛋白的表达（P<0.05）。结论:大麻素受体2激动剂AM1241能够减轻肝细胞损伤,抑制肝组织炎症反应,阻止肝星状细胞的活化并致其凋亡而阻断肝纤维化的发展,其作用机制可能与ERK1/2-RSK1信号通路有关。