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背景： 器官移植已逐渐成为治疗各种终末期肾、肝、心、肺疾病的首选治疗方案，非特异性免疫抑制剂（如环孢素A，FK506）的长期使用不仅花费巨大而且常导致严重的副作用，如机会感染、动脉硬化、肝肾损害以及恶性肿瘤的发生等。因此，寻找一种有效的方法，在不使用免疫抑制剂的情况下，使受者机体对于移植物产生特异性的耐受已经成为移植免疫学领域最为关注的问题。移植排斥反应的核心是T细胞介导的连锁免疫应答，主要通过受者T细胞表面的受体（TCR）识别移植物细胞表面的同种异型抗原而引发。在这个过程中，抗原呈递细胞（antigen presenting cell，APC）起了至关重要的作用。树突状细胞（dendritic cell，DC）是机体的专职APC，它既可通过提呈抗原和协同刺激分子（costimulatory molecules）激活体内静息T细胞，引起T细胞分化、克隆扩增和发生免疫应答，又能通过T细胞凋亡，T细胞无能和促进T调节细胞的生成等进一步介导外周免疫耐受，大量实验证明，未成熟DC（immature，imDC）低表达MHC（major histocompatibility complex）Ⅰ类和Ⅱ类分子，缺少或低表达协同刺激分子B7-1（CD80）、B7-2（CD86）和CD40等，因而在提呈特异性抗原的同时，诱导T细胞特异性无能或凋亡，此现象称为否决效应（veto effect），在移植免疫中显示出其独特的应用价值。但未成熟DC进入受者体内后，在受者体内微环境作用下，很快上调其表面的MHC Ⅱ类分子和B7-2分子的表达，趋向成熟。因而寻求一种新的方法，使DC在输注体内后的一定时间内维持于未成熟状态，从而最大限度地抑制急性排斥反应或诱导供者特异性耐受，已成为亟待解决的课题。已有研究表明，人转化生长因子β1（TGF-β1）是一种具有免疫抑制作用的调节因子，也是抑制移植排斥反应的重要细胞因子。基因工程修饰为改造DC提供了可行性方案。目前基因转导诱导移植耐受的研究主要集中于三个方面：对受者骨髓或胸腺细胞转染供者MHC基因、对移植物细胞转染免疫抑制基因以及对供者来源DC转染免疫抑制性基因。本课题拟以人全长TGF-β1基因通过腺病毒重组，转染供者骨髓来源的imDC，构建TGF-β1-DC，提高供体来源TGF-β1基因过表达的DC在受者体内的微嵌合水平，达到诱导大鼠移植肝脏耐受状态的目的，并进一步探讨相关机制。 目的： 1 建立从大鼠骨髓前体细胞分离、培养imDC的方法