分离纯化出百合原生质体,在适宜的条件下使其萌发出正常的花粉管,并形成新生壁.利用改进的Alex-phalloidin活细胞染色方法及激光共聚焦显微镜技术,观察花粉原生质体极性形成及萌发过程中微丝骨架的列阵变化.结果显示:未水合的花粉原生质体,肌动蛋白以短小的梭形体形式存在,这可能是肌动蛋白的一种储藏形式.水合后刚出壁的原生质体微丝骨架呈均匀紧密的网状结构,形成肌动蛋白的粗束.培养的最初4小时内,是原生质体极性重建的过程.在培养过程中,微丝逐渐向边缘汇集,并由向细胞边缘汇集的平行排列的束状结构、逐渐变成多层连续环绕细胞排列的微丝束.用少量DNP处理过的细胞,微丝不能正常向边缘汇集,微丝的连续排列被打断,在某些区域形成片状分布.这说明肌动蛋白发生空间的重组及极性状态的维持需要能量的供应.培养4小时后,原生质体开始萌发.在花粉管刚形成时,微丝束形成的突起连续延伸至花粉管内.在花粉管最初形成时,花粉管的顶部依然有循环排列的微丝束,与原生质体内微丝相连,并且与原生质的颗粒运动相一致.用latrunculin A处理花粉原生质体,微丝结构被解聚,原生质体萌发受到强烈抑制;用cytochalasin D处理细胞,微丝束变短变粗,原生质体不能萌发;而利用微丝稳定药物phalloidin处理细胞,微丝结构的列阵变化与对照相似,同时,原生质体仍能正常萌发.利用未除壁的成熟花粉进行的药理学实验亦印证了上述结果,并且当去除药物后,花粉萌发率得到部分恢复.上述结果表明,微丝列阵的变化直接参与花粉原生质体的极性重建及花粉萌发.并且,微丝列阵的变化可能主要是通过微丝的重新排列而形成的.此外,我们发现,在萌发过程中,酪氨酸激酶的抑制剂(genistein)对花粉的萌发无明显影响.而另一种PTPs的抑制剂PAO能有效地抑制花粉萌发.在此过程中,微丝的动态变化发生了极大的改变,在微丝的汇合处,肌动蛋白聚集成小的团块,原生质体不能形成极性,原生质体萌发受到抑制.说明此过程中,有某种磷酸酶参与了反应,并且酪氨酸的去磷酸化作用在此过程中起了主导作用.这一实验结果为研究植物细胞中蛋白质酪氨酸磷酸化信号通路与微丝骨架的相互作用奠定了基础.