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磺胺二甲嘧啶(Sulfamethazine, SMZ)是一种广谱抗菌药,常作为饲料添加剂和兽药治疗疾病。近年来,磺胺二甲嘧啶在动物性食品中的残留问题越来越严重。本文建立了HPLC-UV测定血浆和磷酸盐缓冲液中的SMZ及其乙酰化代谢产物(AcSMZ)的方法,并将该方法应用于家兔血浆中SMZ和AcSMZ的药代动力学及体外血浆蛋白结合特性的研究。主要研究内容和结果如下：以乙酰氯和SMZ为原料,三乙胺为赋酸剂,乙酸乙酯直接重结晶分离得到SMZ的主要代谢产物N4-乙酰基磺胺二甲嘧啶(AcSMZ)。建立了简便、快速的测定血浆和磷酸盐缓冲液中SMZ和AcSMZ的HPLC-UV方法。样品经1mL乙酸乙酯超声萃取2次,每次5min,N2吹至净干,500μL乙腈定容,选用PhenomsilC18(250mmm×4.6mm,5μm)作为反相色谱柱分离,乙腈-水(30：70,v/v)作为流动相,流速1mL min-1,检测波长265nm,柱温30℃,整个分析检测过程小于30min。经方法学验证,该方法具有良好的特异性,无其他物质干扰目标物的检测。线性范围为：0.1-50μgmL-1,仪器检出限为15ng mL-1(AcSMZ)和20ng mL-1(SMZ),定量限为50ng mL-1(AcSMZ)和67ng mL-1(SMZ)。高中低三个加标浓度条件下,SMZ和AcSMZ的平均回收率为85.43-99.29%,准确度为1.16-7.81%。仪器日内精密度为0.66-4.40%,日间精密度为1.19-9.05%。该方法基本不受基质效应的影响。实验所用PhenomsilC18色谱柱经2000多个样品的分析检测后,依然保持着良好的分离能力。以建立的HPLC-UV方法研究了SMZ和AcSMZ在家兔体内的药物代谢动力学。9只家兔以100mg kg-1的剂量给予SMZ后,测定血浆中SMZ和AcSMZ的浓度,采用DAS3.1.4药代动力学软件处理药物浓度-时间数据。9只家兔中6只为乙酰化代谢快型,3只为乙酰化代谢慢型,AcSMZ的消除半衰期tl/2在乙酰化代谢快型和慢型个体内分别为7.66±3.28h和9.68±3.96h。SMZ的消除半衰期t1/2在乙酰化代谢快型和慢型个体内分别为15.96±7.78h和16.08±7.47h。AcSMZ的消除率CL在乙酰化代谢快型和慢型个体内分别为3.50±0.75mL min-1kg-1和4.67±2.08mL min-1kg-1。SMZ的消除率CL在乙酰化代谢快型和慢型个体内分为13.25±2.43mL min-1kg-1和5.00±1.00mL min-1kg-1。AcSMZ的药时曲线下面积AUC(0→t)在乙酰化代谢快型和慢型体内分别为455.66±66.28mg h L-1和388.65±137.52mg h L-1。SMZ的药时曲线下面积AUC(o-t)在乙酰化代谢快型和慢型体内分别为126.72±21.96mg h L-1和339.50±69.44mg h L-1。SMZ的代谢具有种属差异性,而且与参与实验的动物年龄、饲养以及环境条件有关。药物与血浆蛋白的结合对药物在体内的分布、代谢和消除具有一定的影响作用,因此,本文研究了SMZ和AcSMZ的体外血浆蛋白结合特性。经平衡透析的血浆样品和磷酸盐缓冲液样品以建立的方法测定得到相应的蛋白结合率。结果表明,SMZ在乙酰化代谢快型和慢型个体内的蛋白结合率没有明显差异,为64.57-68.91%,AcSMZ的蛋白结合率也不受乙酰化代谢类型影响,为88.74-92.96%；SMZ和AcSMZ与血浆蛋白的结合不具有浓度依赖性,AcSMZ对SMZ与血浆蛋白的结合不具竞争性,平衡温度从4℃升高至37℃会降低药物母体及代谢物与血浆蛋白的亲和力从而降低血浆蛋白结合率。这些蛋白结合特性数据为SMZ的药物代谢规律提供参考数据。