红叶腺柳组织培养及建立再生体系研究

来源 :北京林业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ah20090907
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红叶腺柳(Salix chaenomeloides ’Variegata’)抗性强,耐水湿、耐旱、耐寒、耐盐碱,在湿地恢复、园林绿化等方面有一定应用价值。通过组织培养,为红叶腺柳建立快速、不受季节限制的繁殖方式。建立红叶腺柳愈伤组织再生体系,为红叶腺柳转抗虫基因研究提供技术支持。通过试验得出以下研究结果:利用带芽茎段进行快速繁殖:①适宜消毒灭菌方法:选取生长期(5—9月)的带芽茎段,75%酒精处理30-35s+2%NaClO处理15min②适宜诱导侧芽的培养基:WPM空白培养基;③适宜丛生芽增殖培养基:WPM+6-BA1.0mg·L-1+NAAO.1 mg·L-1,适宜试管苗伸长培养基:WPM+6-BA0.5mg·L-1+NAAO.1 mg·L-1+活性炭1.0g.L-1,添加抗褐化剂活性炭,并采用1.0mg·L-16-BA与1.0mg·L-16A-BA交替使用的方法,在保持红叶腺柳高繁殖率的同时促进试管苗高生长,抑制茎尖坏死、玻璃化、褐化等不良现象。继代周期为30d;④适宜生根培养基:1/2WPM+NAA0.05mg·L-1+活性炭1.0g·L-1;⑤适宜的开瓶炼苗天数为5d;适宜移栽基质为泥炭与珍珠岩按1:1的体积比混合使用。利用愈伤组织建立分化不定芽体系:①适宜消毒灭菌方法:选取生长期(2—7月)的叶片,75%酒精处理30-35s+2% NaClO处理10min;②适宜诱导愈伤组织的培养基:MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.5mg·L-1,黑暗处理7d后转入光下培养;③适宜愈伤组织增殖的培养基:MS+6-BA1.0mg·L-1+NAA0.05mg·L-1,继代周期为30d;④诱导愈伤组织分化不定芽的培养基:MS+6-BA4.0mg·L-1。
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