原代骨髓间充质干细胞治疗创伤性脑损伤大鼠模型

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【研究背景】创伤性脑损伤是中枢神经系统的常见病和多发病,其可直接破坏颅内结构,导致患者神经系统功能严重、永久受损,甚至可出现植物生存状态或危及生命。骨髓间充质干细胞具有向其他细胞分化的巨大潜能。国内外学者就这种多能干细胞是否能修复神经系统的不可逆损伤,恢复受损神经功能已展开研究。【目的】本课题研究利用原代培养BMSCs模拟患者受伤即时提取自体干细胞,以干细胞培养的最短周期移植BMSCs治疗创伤性脑损伤,试探索临床应用自体干细胞移植治疗急性创伤性脑损伤。【方法】健康成年雄性SD大鼠,体重300±20g,采用改良的Feeney方法建立模型,用大鼠立体定向仪选取位点,开骨窗,以300g·cm功力冲击大鼠大脑皮层,24h后做改良的神经功能缺损评分。建模成功后单纯随机法进行分组,分为实验组和对照组,每组10只,共用大鼠20只。选取2月龄成年雄性SD大鼠作为骨髓源。分离提取骨髓细胞,孵箱培养原代骨髓间充质干细胞。实验组在立体定向仪定位下移植原代干细胞,对照组注射生理盐水。干预14天后再次做改良的神经功能缺损评分,并将评分结果进行统计学分析。后处死大鼠取脑组织切片,用HE染色法行病理组织学检查,通过Ⅷ因子表达做血管计数,并做统计学分析。【结果】1.病理组织学:肉眼观察大鼠脑表面。实验组脑表面较平整,可见圆形受损区域,周边水肿带不明显;对照组脑表面粘连,组织形态错乱,坏死区域及水肿带较明显。HE染色后,可见受损区坏死脑组织,受损周边炎细胞浸润,实验组坏死区域较对照组小;2.mNSS评分:实验组评分低于对照组(P <0.05);3.微血管计数:两组血管计数有统计学差异,实验组血管计数高于对照组(P <0.05)。【结论】1.移植原代骨髓间充质干细胞治疗组神经功能恢复优于对照组;2.移植原代骨髓间充质干细胞治疗组血管密度高于对照组;3.原代骨髓间充质干细胞能够帮助创伤性脑损伤模型恢复神经功能,并促进血管生长。推测其通过促进血管新生帮助脑组织修复;4.实验验证最短培养周期的原代干细胞早期移植对于治疗急性创伤性脑损伤有意义。
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