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目的 通过临床研究,观察“濡润神珠”针刺法治疗干眼的临床疗效及安全性,为临床提供更加安全有效的治疗方案;通过实验研究,观察针刺对干眼兔泪腺中转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)、白介素 6(interleukin-6,IL-6)表达的影响,探讨针刺治疗干眼的作用机制。方法 临床研究:将60例干眼患者,采用随机数字表法随机分为对照组和试验组,每组30例,对照组患者行倍然滴眼液滴眼,每天3次,每次1滴,治疗4周。试验组患者采用“濡润神珠”针刺法治疗,选用双侧新明Ⅰ、太阳、睛明、攒竹、丝竹空、瞳子髎,隔日1次,每周3次,治疗4周,共12次。观察两组患者治疗前后干眼症状积分、视觉模拟评分(visual analogue scale,VAS)、泪液分泌量试验(schirmer Ⅰ test,SIT)、泪膜破裂时间(tear break-up time,BUT)、角膜荧光素染色(cornea fluorescein staining,CFS)以及临床有效率的差异,并记录不良反应。实验研究:健康纯种雄性新西兰兔随机分为空白组、模型组、氟米龙组、针刺组、假针刺组,每组6只。用氢溴酸东莨菪碱溶液皮下注射制备干眼兔模型。造模后,氟米龙组兔予双眼滴氟米龙滴眼液,每天3次,每次1滴;针刺组电针攒竹、瞳子髎穴15 min,针刺睛明、丝竹空、太阳穴15 min,每天1次;假针刺组选穴同针刺组,用钝针对穴位点刺,不刺入以避免得气,每天1次。以上各组疗程均为2周。观察各组兔SIT、BUT和角膜、泪腺形态学变化,并分别用蛋白质免疫印迹(western blot,WB)法和实时荧光定量聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法检测各组兔泪腺中TGF-β1、IL-6蛋白和mRNA的表达。结果 临床研究:两组患者治疗前干眼症状积分、VAS、SIT、BUT及CFS无明显差异(P>0.05);与治疗前相比,两组患者治疗后干眼症状积分、SIT及BUT明显改善,差异显著(P<0.01);对照组治疗后CFS改善明显(P<0.05),试验组治疗后CFS改善显著(P<0.01)。试验组患者治疗后VAS分值明显降低,差异显著(P<0.01),而对照组VAS分值无明显降低(P>0.05);治疗后组间比较,试验组在改善干眼症状积分、VAS、SIT及BUT方面均优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);而两组CFS差异无统计学意义(P>0.05)。两组总体症状疗效比较,对照组临床痊愈0例,显效5例,有效14例,无效9例,总有效率为67.9%;试验组临床痊愈0例,显效15例,有效9例,无效5例,总有效率为82.8%,疗效差异有统计学意义(P<0.05)。实验研究:造模前各组兔SIT、BUT无明显差异(P>0.05);造模后除空白组,其余各组SIT、BUT显著降低(P<0.01);与治疗前相比,治疗后氟米龙组和针刺组SIT、BUT明显增加(P<0.05),模型组和假针刺组SIT、BUT差异无统计学意义(P>0.05);治疗后组间比较,氟米龙组和针刺组较模型组SIT、BUT明显增加(P<0.05),假针刺组较模型组SIT、BUT差异无统计学意义(P>0.05)。光镜结果显示:空白组兔角膜组织由上皮细胞组成,基质均匀;模型组和假针刺组角膜组织表面上皮细胞可见大量脱落,局灶上皮细胞层数增多,且排列紊乱,黏膜组织间质中淋巴细胞浸润;针刺组和氟米龙组角膜组织表面上皮细胞有少量脱落,可见淋巴细胞浸润。空白组兔泪腺柱状上皮细胞大小均匀,胞浆丰富,排列紧密;模型组、假针刺组泪腺上皮细胞萎缩,黏膜组织间质中可见淋巴细胞、浆细胞浸润;氟米龙组、针刺组泪腺上皮细胞结构基本正常,黏膜组织间质中散在淋巴细胞、浆细胞浸润。与空白组比较,模型组和假针刺组兔泪腺中TGF-β1、IL-6蛋白和mRNA的表达显著增加(P<0.01);与模型组比较,氟米龙组和针刺组兔泪腺中TGF-β1,IL-6蛋白的表达显著降低(P<0.01),mRNA的表达也明显降低(P<0.05);假针刺组兔泪腺中TGF-β1、IL-6蛋白和mRNA的表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论“濡润神珠”针刺法和倍然滴眼液均能改善干眼患者症状,促进泪液分泌,延长泪膜破裂时间,但“濡润神珠”针刺法临床疗效更优;且能有效缓解干眼患者眼部疼痛不适症状,而倍然滴眼液对于缓解患者眼部疼痛症状效果不显;“濡润神珠”针刺法治疗干眼临床运用安全,无明显不良反应。通过角膜、泪腺光镜观察发现针刺能抑制干眼兔角膜和泪腺组织的细胞凋亡和炎症反应;针刺治疗干眼的作用机制可能与其调控泪腺中TGF-β1与IL-6的表达有关。