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目的:研究黄芩苷对人淋巴细胞Toll样受体(TLR)的调节,探讨其在免疫调节方面的作用。方法: 1.采用尼龙毛分离法分离人外周血T和B细胞;2.采用UF-50流式分析寻找最佳黄芩苷作用浓度;3.采用实时定量荧光逆转录聚合酶链反应(RT-PCR),分析在最佳黄芩苷作用浓度处理前后TLRs的表达情况;4.通过受体抑制实验和实时定量荧光RT-PCR探讨黄芩苷对TLRs的调节位点。结果:1.体外孵育48h后,1mg/ml的黄芩苷可以显著促进人T、B淋巴细胞增殖(P<0.05);2.使用1mg/ml黄芩苷相对于未用黄芩苷处理的T、B细胞,其TLR3、TLR7、TLR8及TLR9mRNA的表达均有显著增加(P<0.05),T细胞增加倍数分别为21、15、57和66倍,B细胞增加的倍数分别为24、20、61和63倍,TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6及TLR10 mRNA表达变化不显著(P>0.05);3.在1mg/ml黄芩苷作用下人T、B细胞TLR3、7、8和9 mRNA在12h时表达已开始增加,除T细胞的TLR7 mRNA表达在48h时略有下降外,其余表达基本一直持续增加,至48h到达峰值;4.人T、B细胞在被黄芩苷作用前使用鼠抗人TLR4单克隆抗体封闭,会显著降低黄芩苷对TLR3、7、8和9 mRNA表达的诱导作用(P<0.05),使得T细胞增加倍数分别降为11、5、28和36倍,下降比率分别为47.6%、66.7%、50.9%和45.5%;B细胞增加的倍数分别降为12、11、30和31倍,下降比率分别为50.0%、45.0%、50.8%和50.8%。结论:1.黄芩苷在体外能显著促进T、B淋巴细胞增殖;2.人外周血T、B细胞组成性表达含量差异较大的TLR1-10mRNA,黄芩苷在体外可以显著上调人T、B淋巴细胞TLR3、TLR7、TLR8及TLR9 mRNA的表达,但对TLR1、TLR2、TLR4、TLR5、TLR6及TLR10 mRNA没有影响;3.黄芩苷可能通过TLR4参与对人天然免疫能力的调节。