寨卡(ZIKA)由寨卡病毒(ZIKA virus,ZIKV)感染引起的,是21世纪最具破坏性的传染性疾病威胁之一。ZIKV作为一种新兴蚊媒传播病毒,2007年以前主要表现为散发型,2007年在密克罗西亚的雅浦岛引起了重大疫情。自2015年该病毒传染至巴西以来,病毒迅速蔓延至南美洲、拉丁美洲、非洲、东南亚、太平岛等地区。ZIKV感染可引起神经系统疾病,包括小头畸形和格林-巴利综合征,截止2017年世卫组织报告了84个具有寨卡病毒传播的国家或地区,急需开发安全有效的寨卡疫苗。DNA疫苗又称基因疫苗或核酸疫苗,使外源基因在活体内表达,产生的抗原激活机体的免疫系统,从而诱导特异性的体液免疫和细胞免疫应答。与传统疫苗相比基因疫苗具有一些优越性:质粒DNA非常稳定,使用方便,应用较安全;制备简单,容易大量生产,成本低,易于贮存和运输;能够产生持久的免疫应答,免疫保护力增强;可以插入不同的保护性抗原基因,构成多价或多联疫苗等。佐剂是与抗原或与抗原混合注入机体后,能够增强机体对抗原的免疫应答或者改变免疫反应的类型,属于非特异性的免疫增强剂,而其本身无抗原性。本实验以BALB/c小鼠为实验模型,选用了6种佐剂,将其中2种具有递送功能的刺激物与其余4种成份组合成不同佐剂配方。然后与构建的表达载体DNA疫苗联合免疫小鼠,同时设立对照组,分析其免疫效果。本研究以pVAX1为载体表达ZIKV E、ME保护性抗原为候选疫苗,并进行小鼠免疫原性分析。根据GenBank上已公布的ZIKA基因序列合成ME基因(KU365780)。PCR扩增E、ME蛋白基因,经比对测序结果正确后,连接到pVAX1载体上,构建表达目的蛋白的DNA疫苗。将重组质粒转染至HEK293细胞,采用Western blot检测目的蛋白的表达。结果显示所构建的DNA疫苗在56及68kDa成功表达了E、ME蛋白。本实验通过小鼠免疫实验,分析不同佐剂组合对DNA候选疫苗免疫原性的影响,T细胞亚群检测表明疫苗免疫组,CD3~+CD4~+T、CD3~+CD8~+T淋巴细胞亚型数量高于PBS组;T淋巴细胞增殖实验结果表明含佐剂疫苗免疫组显著高于PBS对照组(P<0.05);ELISA抗体检测结果显示疫苗组能够诱导机体产生较高于PBS对照组的特异性抗体水平;细胞因子检测显示含佐剂组的IL-4及IFN-γ含量显著高于不含佐剂疫苗组(p<0.05)。说明所构建的DNA疫苗能够诱导机体产生体液免疫和细胞免疫,并且初步筛选出两组对ZikaE、ZikaME的DNA候选疫苗有显著提高作用的新型疫苗佐剂,为寨卡疫苗佐剂的选择提供基础。