絮凝剂在大枣多糖提取分离中的应用研究

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本文将絮凝技术应用于大枣多糖的提取分离工艺,以陕北大枣为原料,分别采用两种具有代表性的絮凝剂——壳聚糖和ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂来提取大枣多糖,对絮凝技术在大枣多糖提取分离中的应用作了较为系统的研究,初步探讨了两种絮凝剂的作用机理,并探索出两条具有成本低、周期短、残留少等优点的新型大枣多糖提取工艺。同时,进行了高效液相色谱法测定大枣中环磷酸腺苷含量的研究,并对陕北大枣和新疆大枣中环磷酸腺苷的含量进行了测定及比较。首先,通过分析比较明晰了两种絮凝剂提取大枣多糖的工艺流程,确定了实验结果的分析方法,多糖含量采用硫酸-苯酚法,蛋白质含量采用考马斯亮兰法,溶液澄清度和脱色率采用分光光度计直接测量。其次,研究壳聚糖絮凝剂应用于大枣多糖的提取分离工艺,分析了壳聚糖分子量、添加量、时间、温度、pH等因素对絮凝效果的影响,并在单因素实验的基础上,以多糖含量为指标,选取壳聚糖分子量、添加量、温度和时间进行四因素三水平的正交实验,优化出壳聚糖絮凝提取工艺的最佳工艺条件:壳聚糖分子量为10万、添加量为3mg/mL、温度30℃、时间2h。再次,研究ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂应用于大枣多糖的提取分离工艺,分析了ZTC1+1Ⅱ型絮凝剂添加顺序、添加量、添加比例、时间、温度、pH等因素对絮凝效果的影响,并在单因素实验的基础上,以多糖含量为指标,选取两组份添加量、温度和时间进行四因素三水平的正交实验,优化出ZTC1+1Ⅱ型絮凝提取工艺的最佳工艺条件:B组分添加量为0.70mg/mL、A组分添加量为0.350mg/mL、温度30℃、时间1h。最后,建立了高效液相法测定环磷酸腺苷(cAMP)含量的最佳仪器条件,以Agilent XDB-C18(4.6mm×150mm,5μm)色谱柱为固定相,甲醇-0.05mol/L磷酸二氢钾(10∶90)为流动相,流速1.0mL/min,检测室温度为35℃,检测波长259nm。同时,对样品中环磷酸腺苷含量测量结果显示,不同产地的大枣中cAMP的含量不同,新疆大枣和陕北大枣中cAMP含量分别为320μg/g和306μg/g。
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