慢性萎缩性胃炎癌前病变3个证型的血清差异蛋白质组学研究

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目的研究慢性萎缩性胃炎(CAG)癌前病变3个证型患者血清表达的差异蛋白,寻找CAG癌前病变的差异蛋白及中医辨证的客观依据。方法选取CAG癌前病变患者(脾胃虚弱证、肝胃不和证、脾胃湿热证各10例)共30例、健康对照组10例,对所有入选人员血清进行双向凝胶电泳(2-DE)分离蛋白,与质谱兼容的银染方法染色;应用PDQuest8.0图像分析软件对凝胶图像进行匹配分析,寻找及确定差异蛋白点;运用反相液质联用技术(RPLC-MS)鉴定蛋白,Uniprot及David数据库分析差异蛋白。结果1、CAG癌前病变3个证型差异蛋白鉴定结果(1)CAG癌前病变各组与健康对照组分析得出19个差异蛋白点(P<0.05,蛋白差异倍数上调1.5倍或下调0.7倍,下同),共鉴定出10种蛋白。上调的蛋白有8个,其余两个蛋白密度处于几个证型之间,无明显规律。(2)CAG癌前病变脾胃虚弱证组与健康对照组之间分析得出74个差异蛋白点(P<0.05),共鉴定出14种差异蛋白。上调的蛋白有13个,下调的蛋白有1个。(3)CAG癌前病变肝胃不和证组与健康对照组之间分析得出60个差异蛋白点(P<0.05),共鉴定出9种蛋白。上调的蛋白有5个,下调的蛋白有3个,触珠蛋白含量不确定。(4)CAG癌前病变脾胃湿热证组与健康对照组之间分析得出44个差异蛋白点(P<0.05),共鉴定出7种蛋白。上调的蛋白有3个,下调的蛋白有1个。其余3个含量不确定。(5)CAG癌前病变脾胃虚弱证组与肝胃不和证组分析得出45个差异蛋白点(P<0.05),共鉴定出5种蛋白。上调的蛋白有4个,下调的蛋白有1个。(6)CAG癌前病变脾胃虚弱证组与脾胃湿热证组分析得出41个差异蛋白点(P<0.05),共鉴定出7种蛋白。上调的蛋白有5个,下调的蛋白有2个。(7)CAG癌前病变肝胃不和证组与脾胃湿热证组分析得出32个差异蛋白点(P<0.05),共鉴定出6种蛋白。上调的蛋白有4个,下调的蛋白有2个。2、CAG癌前病变各证型差异蛋白的初步筛选(1)CAG癌前病变各组与健康对照组之间的差异蛋白功能涉及到炎症反应、免疫反应、肿瘤细胞的迁移、再生及凋亡调控等。其中,β2GP与凝集素的作用与肿瘤的发生发展、预后等关系较为密切,可能成为CAG癌前病变的标志性蛋白。(2)结合CAG癌前病变脾胃虚弱证组与其他各组之间的差异蛋白分析,CAG癌前病变脾胃虚弱证组间-α胰蛋白酶抑制剂重链H4(ITIH4)表达含量均较其他组低,可明显与其他组区分开来。ITIH4可能是脾胃虚弱证区别于其他证型及健康对照组的标志蛋白。(3)结合CAG癌前病变肝胃不和证组与其他各组之间的差异蛋白分析,肝胃不和证组较脾胃湿热证组及脾胃虚弱证组触珠蛋白含量减低,触珠蛋白可能是肝胃不和证区别于其他两个证型的标志蛋白。(4)结合CAG癌前病变脾胃湿热证组与其他各组之间的差异蛋白分析,脾胃湿热证组较肝胃不和证组及脾胃虚弱证组免疫球蛋白μ链c区、蛋白AMBP含量均降低,ITIH4均升高。此三者可能是脾胃湿热证区别于其他两个证型的标志蛋白。结论1、CAG癌前病变患者与健康对照者之间的差异蛋白可能是其发病相关蛋白,对其进行验证对CAG癌前病变的诊断有重要作用。2、CAG癌前病变脾胃虚弱证、肝胃不和证、脾胃湿热证与健康对照者之间的差异蛋白可能是其外在证候的内在物质基础,有待进一步进行验证。
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