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开发利用非常规蛋白质饲料资源,是解决我国养殖业长期存在的蛋白质饲料缺乏和顺应当前豆粕减量替代的重要举措。红曲米酒糟是红曲酒的发酵副产物,经测定其干物质中蛋白质水平为46.08%,与豆粕蛋白质含量相当,具备作为替代豆粕的营养学特点。本论文以其为研究对象,以山羊为试验动物,结合瘤胃体外发酵试验和动物饲养试验,研究红曲米酒糟替代豆粕的可行性及其适宜水平。论文分为4个试验。试验一:红曲米酒糟/豆粕山羊瘤胃体外发酵初步对比评价(一)单一红曲米酒糟/豆粕山羊瘤胃体外发酵试验设计:采集6只贵州黑山羊(体重27.28±3.35 kg)的瘤胃液,应用ANKOM RFS产气系统进行空白组(不含发酵底物)、豆粕组(发酵底物为纯豆粕)、红曲米酒糟组(发酵底物为纯红曲米酒糟)体外发酵,每组7个重复,每个重复1套发酵气瓶。测定指标包括:产气量(gas production,GP)、pH、氨态氮(ammonia nitrogen,NH3-N)、干物质降解率(dry matter degradation rate,DMD)、蛋白质降解率(crude protein degradation rate,CPD)、总挥发性脂肪酸(total volatile fatty acid,TVFA)、乙酸、丙酸、丁酸、乙酸/丙酸(acetate/propionate,A/P)、微结晶纤维素酶活、木聚糖酶活、纤维二糖酶活、羧甲基纤维素酶活。试验结果:(1)豆粕组在3~72 h之间各时间点GP均显著高于红曲米酒糟组(P<0.05),而豆粕组pH值、DMD均显著高于红曲米酒糟组(P<0.05),红曲米酒糟组CPD显著高于豆粕组(P<0.05)。且总体来看,豆粕组在整个体外发酵过程中的产气速率高于红曲米酒糟组。(2)体外发酵72 h后,红曲米酒糟组瘤胃液丁酸、微结晶纤维素酶及木聚糖酶活均显著高于豆粕组(P<0.05);同时,豆粕组TVFA、乙酸均比红曲米酒糟组高(P<0.05);两组间NH3-N、丙酸、A/P、纤维二糖酶及羧甲基纤维素酶活无显著差异(P>0.05)。试验小结:红曲米酒糟组山羊瘤胃体外发酵的GP及能源供应效率总体较豆粕组低,不能完全替代豆粕。(二)不同比例红曲米酒糟/豆粕山羊瘤胃体外发酵试验设计:采集6只贵州黑山羊(体重31.37±1.96 kg)瘤胃液,应用ANKOM RFS产气系统进行空白组(不含发酵底物)、对照组(100%豆粕)、处理Ⅰ组(2/3豆粕+1/3红曲米酒糟)、处理Ⅱ组(1/3豆粕+2/3红曲米酒糟)、处理Ⅲ组(100%红曲米酒糟)瘤胃体外发酵。空白组设5个重复,其余4组均设6个重复,每个重复1套发酵产气瓶。测定指标包括:GP、pH、NH3-N、DMD、CPD、有机物降解率(organic matter degradation rate,OMD)、总能降解率(gross energy degradation rate,GED)、TVFA、乙酸、丙酸、丁酸、A/P。试验结果:(1)对于GP,经48 h发酵,对照组在各个时间点(3~48 h)均显著大于其余3个处理组,且随着发酵时间的延长,3个处理组的产气速率逐渐降低(P<0.05)。(2)pH48h、NH3-N、干物质及常规养分降解率。对照组pH48h、DMD、OMD水平显著高于3个处理组,且各组间互为差异显著(P<0.05);对照组、处理Ⅰ组NH3-N水平均显著高于处理Ⅱ组、处理Ⅲ组(P<0.05);对照组CPD显著高于其余各处理组(P<0.05),处理Ⅰ组、处理Ⅱ组及处理Ⅲ组的CPD依次升高,且互为差异显著(P<0.05);对照组GED显著高于各处理组(P<0.05),且处理Ⅰ组、处理Ⅱ组显著高于处理Ⅲ组(P<0.05)。(3)挥发性脂肪酸。对照组TVFA含量显著高于各处理组(P<0.05),且各组间互为显著(P<0.05)。对照组乙酸水平显著高于各处理组(P<0.05),且处理Ⅱ组显著高于处理Ⅲ组(P<0.05)。对照组丙酸水平显著高于各处理组(P<0.05),且处理Ⅰ组、处理Ⅱ组显著高于处理Ⅲ组(P<0.05)。处理Ⅰ组、处理Ⅲ组A/P水平显著高于处理Ⅱ组(P<0.05);各组丁酸差异不显著(P>0.05)。试验小结:与豆粕相比,红曲米酒糟总体发酵能力及能源供应效率偏低。红曲米酒糟≧33%时不能完全替代豆粕。试验二:不同日粮水平红曲米酒糟山羊瘤胃体外发酵特性研究试验设计:采集9只贵州白山羊(体重28.27±1.68 kg)的瘤胃液,应用ANKOM RFS产气系统进行对照组、处理Ⅰ组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组瘤胃体外发酵。发酵底物日粮组成及营养水平为(%DM):玉米33、豆粕8、菜粕2.5、麸皮4、磷酸氢钙1、食盐0.5、预混料1、苜蓿草粉30、蚕豆秸秆粉20;蛋白质12.70、代谢能8.86 MJ/kg。对照组发酵底物不含红曲米酒糟,处理Ⅰ组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组分别含有50、100、150 mg/g的红曲米酒糟。每组7个重复,1个重复1套发酵瓶。测定指标包括:72 h GP、pH、NH3-N、DMD、VFA与纤维素酶活。试验结果:(1)处理Ⅲ组在1~5 h内GP显著高于对照组(P<0.05);各组DMD差异不显著(P>0.05);各组pH均处于正常水平,且NH3-N浓度组间差异不显著(P>0.05)。(2)处理Ⅲ组TVFA显著高于处理Ⅱ组,各组乙酸、丙酸、丁酸与乙酸/丙酸差异不显著(P>0.05)。(3)处理Ⅲ组木聚糖酶活、纤维二糖酶活均显著高于对照组(P<0.05)。试验小结:红曲米酒糟(15%)具备作为山羊蛋白质饲料原料的营养学条件,值得进一步研究其在生产利用时的日粮适宜水平。试验三:红曲米酒糟对山羊生长性能及血液代谢的影响试验设计:选取28只年龄、体重(15.95±4.28 kg)基本一致的贵州白山羊为试验动物,将其分为4组:对照组、处理Ⅰ组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组,每组7个重复,每个重复1只羊。对照组饲喂基础日粮,不含红曲米酒糟;处理Ⅰ组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组分别饲喂含10%、20%和30%红曲米酒糟的日粮。试验持续38 d,包括预饲期10 d、正试期28 d,正试期每隔14 d采血一次。测定指标包括:生长性能,血液生化指标、抗氧化指标、脂质代谢指标。试验结果:(1)各组山羊的干物质采食量(dry matter intake,DMI)、末重(final weight,FW)、平均净增重(average net body gain,ANG)、平均日增重(average daily body gain,ADG)与料重比(feed/gain,F/G)差异均不显著(P>0.05),但处理Ⅰ组效果最佳。(2)对照组与处理Ⅰ组GE、CP及中性洗涤纤维(neutral detergent fiber,NDF)消化率均高于处理Ⅱ组、处理Ⅲ组(P<0.05)。处理Ⅰ组、对照组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组酸性洗涤纤维(acid detergent fiber,ADF)消化率依次降低且互为差异显著(P<0.05)。对照组、处理Ⅰ组OM消化率均高于处理Ⅲ组(P<0.05)。(3)14 d时,各组间葡萄糖(glucose,Glu)、谷丙转氨酶(alanine transaminase,ALT)、谷草转氨酶(aspartate transaminase,AST)、总蛋白(total protein,TP)、白蛋白(albumin,ALB)及尿酸(uric acid,UA)浓度差异不显著(P>0.05)。至28 d时,对照组、处理Ⅰ组的UA含量均高于处理Ⅱ组、处理Ⅲ组(P<0.05),同时处理Ⅱ组高于处理Ⅲ组(P<0.05);各组间Glu、TP、ALB、AST与ALT浓度差异不显著(P>0.05)。(4)14 d时,各组间谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)浓度差异不显著(P>0.05);处理Ⅰ组、对照组、处理Ⅱ组及处理Ⅲ组过氧化氢酶(catalase,CAT)浓度依次降低且互为差异显著(P<0.05);处理Ⅰ组超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)显著高于对照组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组(P<0.05);处理Ⅲ组丙二醛(malondialdehyde,MDA)高于对照组、处理Ⅰ组、处理Ⅱ组(P<0.05)。至28 d时,对照组GSH-Px高于处理Ⅰ组、处理Ⅱ组、处理Ⅲ组(P<0.05);处理Ⅰ组CAT高于处理Ⅲ组(P<0.05);处理Ⅰ组SOD高于对照组(P<0.05);对照组、处理Ⅲ组MDA高于处理Ⅰ组(P<0.05)。(5)28 d时,处理Ⅲ组(triglyceride,TG)水平显著高于对照组(P<0.05);处理Ⅱ组、处理Ⅲ组(total cholesterol,TC)浓度均较对照组高(P<0.05);各组间低密度脂蛋白(low density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)与高密度脂蛋白(high density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)浓度差异不显著(P>0.05)。试验小结:红曲米酒糟对山羊的生长性能未产生负面影响,低水平红曲米酒糟可提高山羊养分消化率,增强机体抗氧化能力。综合来看,在本研究条件下,以红曲米酒糟水平为10%(或占日粮蛋白质饲料原料的71%)时饲喂效果最佳。试验四:红曲米酒糟替代豆粕对山羊瘤胃健康及微生物区系的影响(一)瘤胃体内发酵试验试验设计:选取14只健康、年龄接近的贵州白山羊为试验动物,按照体重(29.09±1.19 kg)基本一致的原则,将其分为2组:对照组(蛋白质饲料为豆粕)、处理组(蛋白质饲料为红曲米酒糟),每组7个重复,每个重复1只羊。对照组饲喂含10%豆粕的基础日粮,处理组饲喂以红曲米酒糟完全替代豆粕的日粮。试验持续31 d,包括7 d预饲期,24 d正试期。检测指标包括:血浆生化指标;pH、NH3-N、缓冲能力、乙酸、丙酸、丁酸、总挥发性脂肪酸(TVFA)、乙酸/丙酸(A/P)、微晶纤维素酶活、木聚糖酶活、纤维二糖酶活、羧甲基纤维素酶活、瘤胃微生物区系。试验结果:两组山羊血浆生化指标(Glu、ALT、AST、TP、ALB、TC、LDL-C、HDL-C、UREA)没有影响,差异不显著(P>0.05)。两组山羊瘤胃pH、NH3-N、缓冲能力、乙酸、丙酸、丁酸、TVFA、A/P、微晶纤维素酶活、木聚糖酶活、纤维二糖酶活、羧甲基纤维素酶活水平也未受红曲米酒糟替代豆粕的影响,差异不显著(P>0.05)。红曲米酒糟替代豆粕对山羊瘤胃微生物区系多样性(Observed species、Chao 1、Shannon、Simpson)、主要菌门(拟杆菌门、厚壁菌门、变形菌门、柔膜菌门、纤维杆菌门、螺旋体门)、菌属(普雷沃氏菌属、Rikenellaceae_RC9_gut_group、Ambiguous_taxa、Succinivibrio、Prevotellaceae_UCG-003)的组成和丰度差异不显著(P>0.05)。试验小结:红曲米酒糟替代日粮豆粕(占10%)对山羊血液生化指标没有不利影响,同时对山羊瘤胃健康及微生物区系未产生负面作用。(二)瘤胃体外发酵试验试验设计:以上述瘤胃体内发酵试验山羊采食的饲粮作为发酵底物,采集5只贵州白山羊(体重26.53±3.42 kg)瘤胃液,应用ANKOM RFS产气系统进行空白组、对照组(发酵底物为豆粕组日粮)、处理组(发酵底物为红曲米酒糟组日粮),每个处理设7个重复,每个重复1套发酵产气瓶。检测指标包括:GP、DMD、CPD、pH、NH3-N、乙酸、丙酸、丁酸、TVFA、A/P、微晶纤维素酶活、木聚糖酶活、纤维二糖酶活、羧甲基纤维素酶活。试验结果:处理组在体外发酵前期(4~12 h)的GP在数值上高于对照组(P>0.05),之后处理组GP低于对照组(P>0.05);两组日粮体外发酵72 h后,处理组CPD显著高于对照组(P<0.05),对照组DMD显著高于处理组(P<0.05),pH、NH3-N差异不显著(P>0.05);处理组丁酸、微晶纤维素酶活显著高于对照组(P<0.05),同时,对照组乙酸、木聚糖酶活及羧甲基纤维素酶活均显著高于处理组(P<0.05),两组TVFA、丙酸、A/P及纤维二糖酶活无显著差异(P>0.05)。试验小结:与日粮中含10%豆粕相比,红曲米酒糟替代豆粕未对山羊瘤胃体外发酵特性产生影响。论文总体结论:由上述4个试验结果可见,适宜水平的红曲米酒糟有助于改善山羊血液生化状况及抗氧化活性,同时不改变山羊瘤胃微生物区系。总体而言,红曲米酒糟可替代山羊日粮豆粕,但占日粮比例不宜超过10%。