【摘 要】
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该文以高产脂肽生产菌Bacillus subtilis NK-L为材料,探索脂肽合成酶基因(lps)转录调节的分子遗传学机理,特别是早期感受态基因(comA)对lps基因的转录调控.研究内容主要包括
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该文以高产脂肽生产菌Bacillus subtilis NK-L<,1>为材料,探索脂肽合成酶基因(lps)转录调节的分子遗传学机理,特别是早期感受态基因(comA)对lps基因的转录调控.研究内容主要包括以下五部分:(1)对脂肽高产菌株采用多相分类技术,综合其表型、基因型和系统发育的信息,确立分类地位;(2)采用基因敲除技术构建缺失菌株,确立comA基因与lps基因之间的关系;(3)采用报道基因融合技术研究comA基因与lps基因的时序表达模式;(4)对高产脂肽菌株直接进行遗传操作,研究构建工程菌的理论基础和策略,构建一系列穿梭表达载体,研究comA基因对lps基因的转录调控模式;(5)利用Bacillus licheniformis NK-X<,3>研究脂肽性能及其在突破微生物特重原油开采局限上的可能性.通过对脂肽高产菌株进行遗传操作,制备出转化率高达1×10<8>个转化子/μg DNA的感受态;利用comA基因获得了提高脂肽产量的证据,证实了早期感受态基因comA是脂肽合成酶基因转录和表达的前提条件;提出了完整的comA基因与lps基因的时序表达模式;证实了脂肽具有改变细胞表面亲疏水性的作用和抗生素活性;该研究突破了微生物开采特重原油油藏的局限性,在辽河冷东油田特重原油油藏单井处理中获得成功,开发了特重原油油藏蒸汽开采后期的接替技术.
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