本研究采用RT-PCR与RACE相结合的技术对葫芦科植物红花栝楼和木鳖子三萜合成通路关键酶鲨烯合酶cDNA进行克隆,并对重组的木鳖子鲨烯合酶基因进行原核表达。在此基础上对红花栝楼和木鳖子SS基因进行生物信息学分析。主要研究结果如下：(1)获得红花栝楼鲨烯合酶基因cDNA序列。所获得的红花栝楼鲨烯合酶cDNA序列含有1466个核苷酸,其中包括含有1254个核苷酸的开放读码框序列,编码417个氨基酸残基。通过NCBI的Blast比对,发现红花栝楼SS基因编码的氨基酸序列与已知植物SS基因编码的氨基酸序列同源性为78%～94%,核苷酸的同源性为74%～93%。目前通过系统发育分析,发现红花栝楼与罗汉果、绞股蓝的亲缘关系最近,这也证实葫芦科植物鲨烯合酶基因的同源性,与预测结果相符合。同时还发现葫芦科植物与金铁锁SS基因亲缘关系也比较近。根据NCBI采纳的植物分类表,金铁锁属于石竹科。形态学分类中,葫芦科与石竹科处于不同分支,但SS的亲缘关系需要进一步探讨。(2)获得木鳖子鲨烯合酶基因cDNA序列。所获得的木鳖子鲨烯合酶cDNA基因序列共有1449个核苷酸,其中包括一个含有1254个核苷酸的开放读码框序列,编码417个氨基酸残基,相对分子量约为47.8 kDa。通过NCBI的Blast比对,发现木鳖子SS基因编码的氨基酸序列与已知植物SS基因编码的氨基酸序列同源性为800%～94%,核苷酸的同源性为73%-92%。系统进化分析表明,木鳖子与红花栝楼、罗汉果、绞股蓝的亲缘关系近,进一步证实葫芦科植物鲨烯合酶基因的同源性,与预期结果相符。(3)木鳖子鲨烯合酶基因原核表达。在得到木鳖子SS基因cDNA序列后,重新设计带有酶切位点的引物,克隆木鳖子SS基因cDNA读码框序列；将SS基因cDNA读码框架序列与表达载体pET32a(+)连接,成功构建表达重组质粒pET32a(+)-SS,并在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达出约66kDa的目的融合蛋白,其中pET32a(+)表达标签大小约为18.3 kDa。本研究成功克隆了红花栝楼和木鳖子SS的cDNA,为进一步研究红花栝楼与木鳖子SS基因结构、基因表达、基因突变提供了基础,并为葫芦科植物中三萜合成通路关键酶SS的正选择位点和功能的关联性分析提供了数据支持。