目的：　　原发性肝癌是世界上常见的恶性肿瘤之一，其中约54％发生在中国，我国每年有37万人死于肝癌，居所有恶性肿瘤死亡的第二位。由于原发性肝癌在人群中的高普遍性和高危害性，对原发性肝癌的发生和发展及其防治方面的研究一直是国内外的研究热点。目前原发性肝癌的确切发病及发展恶化的机制尚不清楚，但近代细胞遗传学和分子生物学研究表明，肿瘤的发展是多基因、多阶段的复杂过程。随着分子生物学理论与技术的发展，遗传因素被证实与肝细胞癌有着密切关系。　　在基因组中，最普遍的变异就是单个碱基的差异，可以分为转换与颠换、单碱基的插入与缺失等不同类型。对于其中发生率大于1％的变异被称作单核苷酸多态性（single uncleotide polymorphism，SNP）。近年来，美国国立人类基因组研究院与SNP研究委员会(The SNP Consortium，TSC)发起的对SNP的大规模实验研究表明，单核苷酸变异能够为研究多基因复杂疾病及个体间患病风险及药物反应的不同提供新方法。人类所有群体中存在的SNP位点约1500万个，平均每300～600bp存在一个基因突变。这些SNP可能是直接影响某些疾病如肿瘤、哮喘、心脏病的易感性基因位点。而如何使用SNP多态信息探索各种恶性肿瘤的的遗传机制及在临床上的应用已经成为当前国内外的研究热点。　　维生素D结合蛋白(vitamin D-binding protein，VDBP或Gc-globulin)是一种相对分子量为51000～58000的多功能血浆球蛋白，主要合成于肝脏，和ALB、AFP、AFM一样，是属于白蛋白超家族中的一种结合蛋白，大部分为游离态的天然蛋白形式。近年来，人们在临床实验研究中发现VDBP与乳腺癌及前列腺癌、结肠癌等的发生均具有一定相关性。JakobAlbrethsen在对小鼠的肝癌组织中部分蛋白的检测发现VDBP在小鼠的肝癌组织中表达明显增高，但在癌前病变中表达量较低，其基因多态性可能与肝癌的关系在肿瘤防治中具有重要的意义。目前有关VDBP基因突变和人类原发性肝癌的发病风险的报道较少且结果不一，应进行深入研究。　　本实验通过检测原发性肝癌患者VDBP Glu416Asp(rs7041)、Thr420Lys(rs4588)位点的多态性，并考察伴有肿瘤血清学标志物、相关临床参数的影响。为探讨VDBP多态性和原发性肝癌患者发病的风险提供实验依据。　　实验方法：　　1、本研究采用以医院为基础的病例-对照研究方法。病例为2007年1月至2010年12月在中国医科大学附属第一医院进行住院治疗，临床诊断明确，未经放射和抗癌药物治疗的149例年龄为31～85岁的肝癌新发病例;对照组为同期在同一医院体检中心进行健康体检且体检结果正常、无肿瘤病史及遗传病史且年龄与病例组相匹配的246例健康人群。在随机血液样品标本的同时，收集每个研究对象的人口学资料集临床相关参数。　　2、采用酚氯仿法从抗凝血中提取基因组DNA，接下来通过聚合酶链反应-实时荧光定量的方法，检测VDBP Glu416Asp、Thr420Lys位点基因型。　　3、统计学分析:应用统计分析软件包SPSS19.0计算。采用卡方检验比较基因型的组间分布频率，分析不同基因型与原发性肝癌的相关性。采用非条件logistic回归分析计算比值比(odds ratios，OR)和95％可信区间(confidence interval，CI)，分析不同基因型与原发性肝癌风险和临床病例特征之间的相关性。所有的统计学检验均为双侧概率检验，P＜0.05为差异有统计学意义。　　结果：　　1、rs7041位点在肝癌组中基因型分布如下:基因型Asp/Asp为60人，基因型Asp/Glu为70人，基因型Glu/Glu为19人，分别占40.3％、47.0％、12.8％;在对照组中基因型分布如下:基因型Asp/Asp为112人，基因型Asp/Glu为103人，基因型Glu/Glu为31人，分别占45.5％、41.9％、12.6％。经卡方检验证实rs7041多态位点在对照组中基因型分布频率符合Hardy-Weinberg平衡遗传平衡定律(P＞0.05)。rs4588位点在肝癌组中基因型分布如下:基因型Thr/Thr为85人，基因型Thr/Lys为58人，基因型Lys/Lys为6人，分别占57.0％、38.9％、4.0％;在对照组中基因型分布如下:基因型Thr/Thr为125人，基因型Thr/Lys为104人，基因型Lys/Lys为17人，分别占50.8％、42.3％、6.9％。　　2、经Logistic回归分析我们发现以rs7041基因型Asp/Asp为参照，基因型Asp/Glu个体的发病风险未见增高(OR=1.144，95％CI:0.596-2.195，P=0.686)，在基因型Glu/Glu中末见明确相关性（OR=1.26995％CI:0.820-1.963，P=0.285）。此外，rs4588多态基因型和肝癌发病风险也未见相关性，与携带基因型Thr/Thr个体相比较，携带基因型Thr/Lys个体与肝细胞癌的发病风险未见明显差异（OR=0.519，95％CI:0.197-1.370，P=0.185），携带基因型Lys/Lys个体与肝细胞癌的发病风险未见明显差异(OR=0.820，95％CI:0.537-1.252，P=0.358)。　　3、本研究的临床参数包括血清AFP水平、肝炎标志物(B、C、B+C、NBNC)、肝硬化、ECOG评分、肿瘤大小(≤5 cm、＞5 cm、diffuse)、Child-pugh(A、B)分级等信息，经统计分析后，rs7041位点和肿瘤大小具有一定相关性(P=0.031)。其余临床参数和所研究的两个位点均没有发现相关性。　　结论：　　1、、VDBP Glu416Asp、Thr420Lys突变基因与原发性肝癌发病风险无相关性，VDBP不是原发性肝癌易感的候选基因;　　2、VDBPGlu416Asp突变基因型可能与原发性肝癌患者肿瘤大小存在相关性。