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目的: 探讨胆管癌中Beclin1的表达及意义。采用免疫组化方法、western blot与Real-time RT-PCR检测不同分化程度胆管癌组织中Beclin1的表达情况,并结合临床随访资料分析,探讨其表达与胆管癌的临床病理参数之间的关系,旨在为判断胆管癌患者预后提供参考指标。 方法: 取我院2009年1月至2011年1月间手术切除并经病理证实的胆管癌标本67例。其中男40例,女27例,平均年龄57.5岁(32~75岁)。高/中分化癌53例、低分化癌14例;伴有转移者24例(包括淋巴结、肝、胆囊、肠系膜和胰腺等),无转移者43例。按TNM分期:Ⅰ+Ⅱ期42例,Ⅲ+Ⅳ期25例。67例胆管癌标本中,获得术后3~36个月随访者60例,其中已死亡病例49例,尚生存病例11例。取与本组胆管癌相应的20例正常胆管组织作为对照。标本均经40 g/L中性福尔马林液固定,石蜡包埋,4μm厚连续切片。另留取20例胆管癌组织标本和癌旁组织标本手术时立即取材的新鲜冰冻组织标本,置液氮冷却后送-70℃冷冻冰箱保存,以供Western-blot与Real-time RT-PCR检测。 结果: 免疫组化结果显示Beclin1在胆管癌组织与癌旁组织中表达比较,差异有显著性,P<0.05。Western blot结果中Beclin1蛋白表达情况与免疫组化结果相似,所有胆管癌组织标本均有表达。Beclin1蛋白在胆管癌组织中的表达相对含量显著低于正常胆管组织(P<0.05)。Real-time RT-PCR结果证实Beclin1 mRNA在所有胆管癌旁组织标本均有表达。胆管癌组织中Beclin1 mRNA相对表达量显著低于正常胆管组织(P<0.05)。胆管癌组织中Beclin1蛋白的表达均与胆管癌的分化程度、TNM分期相关(r=0.264,P=0.024;r=0.536,P=0.000)。Beclin1的表达均与胆管癌患者年龄、性别和肿瘤大小等临床病理参数均无关。由患者的生存函数曲线可以看出,Beclin1蛋白的表达与患者预后生存率相关件很高。存临床病例参数中,TNM分期(P<0.05)、肝癌分化程度(P<0.05)和有无淋巴结转移(P<0.05)对术后平均无复发生存时间均有明显影响。将Beclin1蛋白表达、TNM分期、分化程度和有无淋巴结转移进行多因素Cox比例风险模型分析,结果见表3,从表中可见Beclin1蛋白表达(P<0.05)、TNM分期(P<0.05)和与预后明显相关。分化程度(P=0.056)和有无转移(P=0.926)与预后无明显相关。 结论: Beclin1蛋白表达增高与胆管癌的发生、发展有关,在胆管癌组织中低表达,而且Beclin1的表达与肿瘤的分化程度及TNM分期相关,并且Beclin1是在胆管癌中的表达一种保护性因素。