马钱子和格木内生真菌的化学成分及生物活性研究

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本论文包括马钱子的化学成分及其生物活性研究和格木内生真菌AspergillusfumigatusFresen.化学成分及其生物活性研究两部分。马钱子为马钱科马钱属植物马钱子(Strychnosnux-vomicaL.)的干燥成熟果实。马钱子属约有200种,分布于热带和亚热带地区,我国有9种。马钱子在我国作为药用具有悠久的历史,具有通络止痛、散结消肿的功效,可用于治疗跌打损伤、骨折肿痛、风湿顽痹、麻木瘫痪、痈疽疮毒、咽喉肿痛等。从19世纪开始,国内外对马钱子进行了大量的、深入的研究,到目前为止,从马钱子属中分离得到的主要活性物质为吲哚生物碱。本论文为了寻找新的活性成分,在综述了马钱子属植物化学成分和药理活性研究的基础上,对马钱子的化学成分进行了系统的分离研究,从中分离并鉴定了42个化合物,包括25个生物碱,7个木脂素,4个单萜和6个酚酸类衍生物,采用光谱学方法确定它们的结构,分别为:stryvomicine (1),stryvomitine (2),isopseudostrychnine (3), 5-oxobrucine (4), 5-oxopseudostrychnine (5), 11-hydroxyl-icajine (6), 10-hydroxyl-icajine (7), 5-hydroxy l-vomicine (8), deoxy-isostrychnine-chloromethochloride (9), strychnine (10), pseudostrychnine (11), brucine (12),pseudobrucine (13), icajine (14), vomicine (15), novacine (16), icajine-N-oxide (17),pseudo-α-colubrine (18), 12-hydroxyl-pseudostrychnine (19), 12-hydroxyl-strychnine(20), 15-hydroxyl-novacine (21), deoxy-isostrychnine (22), strychnine-chloromethochloride (23), indole-3-carboxaldehyde (24), indole-3-ethanol (25),decedrusine A (26), dihydrodihydrodiconiferyl alcohol (27), isolariciresinol (28),secoisolariciresinol (29),erythro-guaiacylglycerol-β-0-4’-coniferyl alcohol (30),erythro-guaiacylglycerol-β-O-4’-dihydroconiferyl alcohol (31), 4,4’-dimethoxy-3-hydroxy-7,9’,7’,9-diepoxyligan-3-O-p-D-glucopyranoside (32), 1-deoxyloganin aglycone (33), dehydrovomifoliol (34), boscialin (35), 1-(-3-hydroxybut-1-enyl)-2,2,6-trimethylcyclohexane-1,4-diol (36), p-hydroxybentyletnene-ether (37),4-(2,3-dihydroxypropyl)-2,6-dimethoxyphenol (38), 4-methoxyl-1,2-phenyldiol (39),hydroquinone (40), ferulic acid (41), 4-(2-hydroxyethyl)-2-methoxybenzoic acid(42)。其中化合物1为一个新骨架化合物,化合物2-9和26为新化合物。采用计算CD的方法确定了化合物1的绝对构型,并对它的生源途径进行了初步的推测,同时采用CD方法确定了化合物2、6、7、8和26的绝对构型。以体外活性追踪方法对生物碱类型的化合物进行了细胞毒、神经毒、抗炎和神经保护功能的活性测试。化合物6和7对神经PC12细胞显示出微弱的保护作用,IE50分别为0.68-4.81μM和 0.54-6.50 μM。豆科格木属(Erythrophleum)植物,世界上共有15种,分布于非洲的热带地区、亚洲东部的热带和亚热带地区以及澳大利亚北部。该属植物我国只有一种,即格木(Erythrophleum fordii Oliver)。本课题组曾对广西格木属植物格木(Erythrophleum fordii Oliver)的茎皮进行了系统的化学成分研究,从中分离得到一系列具有显著细胞毒活性的卡萨因型二萜生物碱。在此基础之上,本文对格木茎皮的内生真菌进行了分离,根据初步的细胞毒活性筛选和化学筛选结果,选择其中的活性菌株Lyb038进行放大发酵并对其菌液的乙酸乙酯部位进行化学成分分离,结合多种化学分离方法从其提取物中分离鉴定了 10个化合物,包括9个环二肽类和1个酚酸类化合物,经光谱学分析确定其结构分别为:fumitremorginC(43),8,9-dihydroxyl-fumitremorginC(44),环(L-脯-L-色)二肽(45),N-异戊二烯基-环(Z-脯-Z-色)二肽(46),环-(D-脯-Z-亮)(47),环-(D-脯氨酸-D-亮氨酸)(48),6-methoxyl-spirotryprostatin B (49),spirotryprostatin A (50),pseustin A (51),对轻基苯乙醇(52),并对以上化合物进行了细胞毒活性测试。菌株Lyb038经显微形态观察和分子序列分析鉴定为:烟曲霉Aspergillus fumigatus Fresen。
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