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目的:为研究白香丹胶囊的抗焦虑作用,分别选择不同造模方法以建立焦虑大鼠模型。在选择适宜焦虑大鼠造模方法基础上进行白香丹胶囊(BXD)抗焦虑作用的基础药效学研究。采用适宜焦虑大鼠造模方法和BXD最佳作用剂量,通过比较分析模型组和用药组大鼠血清去甲肾上腺素(NA)、脑源性神经营养因子(BDNF)水平和脑区α1A-肾上腺素受体(α1A-AR)、BDNF蛋白表达变化,从分子水平上揭示BXD抗焦虑作用的可能药物靶点及作用机制。方法:分别采用不确定空瓶刺激法和足底电击法建立焦虑大鼠模型,通过旷场实验和高架十字迷宫实验对各组大鼠行为学进行评价,观察白香丹胶囊抗焦虑作用。再选择适宜焦虑大鼠模型进行中药白香丹胶囊抗焦虑作用的低(100mg·kg-1·d-1)、中(200mg·kg-1·d-1)、高剂量(400mg·kg-1·d-1)药物效应梯度研究,以地西泮作为阳性对照(1mg·kg-1·d-1)。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测各组大鼠血清NA、BDNF水平,蛋白质印迹方法(Western Blot)检测各组大鼠脑区α1A-AR、BDNF蛋白的表达。实验数据采用SPSS17.0软件分析,用Graph Pad Prism5.0软件进行统计作图。结果:1.分别采用不确定空瓶刺激法和足底电击法建立焦虑大鼠模型,旷场实验和高架十字迷宫实验结果表明,与空白组大鼠比较,模型组大鼠旷场实验总路径增高(P<0.01),高架十字迷宫实验进入开放臂次数百分数(OE%)和开放臂停留时间百分数(OT%)均降低(P<0.01),不确定空瓶刺激法和足底电击法均为有效的焦虑大鼠造模方法,并且初步的药效学研究结果提示白香丹胶囊具有抗焦虑作用。通过比较两种造模方法发现,足底电击法造成的焦虑烦躁症状较好模拟了临床焦虑症患者临床表现,且造模方法成熟可靠,比较适合进行大规模的药物筛选实验,因此本研究决定选择足底电击法制备焦虑大鼠模型进行后续药效学及机制研究。2.采用足底电击法制备焦虑大鼠模型,进行白香丹胶囊抗焦虑作用的量效关系评价。与空白组大鼠比较,模型组大鼠旷场实验总路径增高(P<0.01),高架十字迷宫实验进入开放臂次数百分数(OE%)和开放臂停留时间百分数(OT%)均降低(P<0.01);与模型组比较,BXDII组和DZP组大鼠旷场实验总路径均显著降低(P<0.01),EPM中的OE%和OT%值均升高(P<0.01),而BXDI组、BXDIII组大鼠旷场实验总路径和OE%和OT%值均分别表现出增加和降低趋势,但未见统计学意义。结果表明BXD在200mg·kg-1·d-1时有明显的抗焦虑作用,但抗焦虑作用未随着剂量的增加或减少而增强。3.白香丹胶囊对足底电击法诱导焦虑模型大鼠血清及脑区NA和BDNF水平影响:ELISA检测结果显示,与空白组比较,模型组大鼠血清NA水平升高(P<0.01)、BDNF水平降低(P<0.01);给药干预后,DZP组和BXDII大鼠血清NA水平低于模型组(P<0.05)、BDNF水平高于模型组大鼠(P<0.05)。蛋白印迹结果显示模型组大鼠左海马、右海马BDNF蛋白表达水平均低于空白组大鼠(P<0.05或P<0.01),BXD中剂量组和DZP组大鼠左海马、右海马区的BDNF蛋白表达水平均高于模型组大鼠(P<0.05或P<0.01);模型组大鼠额叶、下丘脑BDNF蛋白表达水平均高于空白组大鼠(P<0.01),BXD中剂量组和DZP组大鼠额叶、下丘脑区的BDNF蛋白表达水平均低于模型组大鼠(P<0.01)。模型组大鼠左海马、右海马、额叶、下丘脑的α1A-AR蛋白表达水平均高于空白组(P<0.01);BXD中剂量组和DZP组的α1A-AR蛋白表达水平均低于模型组(P<0.05或P<0.01)。结论:1.不确定性空瓶刺激法和足底电击法均可成功制备焦虑大鼠模型,中药白香丹胶囊可在一定程度上改善大鼠的焦虑样行为,具有较好的抗焦虑作用。而足底电击法以其重复性好、成熟可靠等优点,比较适合大规模药物筛选实验及药物作用机制研究,是比较理想的焦虑动物造模方法。本研究从非条件反应模型和条件反应模型不同角度观察白香丹胶囊的抗焦虑作用,增加了药效学评价的可靠性。2.白香丹胶囊抗焦虑作用的量效关系评价结果显示,模型组大鼠较空白组大鼠旷场实验总路径增高(P<0.01),高架十字迷宫实验进入开放臂次数百分数(OE%)和开放臂停留时间百分数(OT%)均降低(P<0.01),而各用药组较模型组均表现降低或增加趋势,其中以白香丹中剂量组(临床推荐剂量8倍)具有显著性差异(P<0.01),但抗焦虑作用未随着剂量的增加或减少而增强。3.通过作用机制实验研究发现,白香丹胶囊发挥抗焦虑作用主要通过降低血清NA水平、提高BDNF水平,同时与增加海马及降低额叶、下丘脑BDNF蛋白表达或降低中枢α1A-AR蛋白表达有关,BDNF和α1A-AR可能是白香丹胶囊的作用靶点。本研究结果为中药复方发挥作用的作用靶点及机制探讨提供了线索。