朱顶红和威尼替舞花姜及盐桦的组织培养研究

来源 :仲恺农业工程学院 | 被引量 : 0次 | 上传用户:grindswods
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近年来,花卉产业发展迅速,新奇品种具有广阔的市场前景,而极小种群野生植物也急需解决其繁殖技术问题;运用组织培养技术,可快速繁殖出大批量的花卉种苗和扩大极小种群野生植物数量以满足市场需求和达到保护资源的目的。本文以新奇花卉朱顶红‘圣茵3号’(Hippeastrum‘Shengyin NO.3’)、威尼替舞花姜(Globba winitti)和极小种群野生植物盐桦(Betula halophile)为材料,建立离体快繁体系,以期为这三个种类(品种)的规模化生产提供技术支持。主要研究结果如下:(1)以朱顶红鳞茎为外植体,用75%酒精棉球将鳞茎表面擦拭干净,再将外植体浸泡于75%酒精中30 s,0.10%HgCl2连续消毒5 min+3 min+2 min,能获得较高成功率,鳞茎诱导培养基是MS+5.00 mg/L 6-BA,最合适的增殖及生长的基本培养基为LS培养基;鳞茎增殖最佳的切分方式为八分切,培养30 d和60 d后鳞茎的增殖倍数分别为14.28和15.11;最适合鳞茎增殖的植物生长调节剂为6-BA,将鳞茎四分切后于LS+4.00 mg/L 6-BA中培养60 d,鳞茎增殖倍数为11.07;6-BA和NAA配合使用可达到壮苗的效果,采用MS+4.00 mg/L 6-BA+1.50 mg/L NAA培养基,鲜重增量最高;MS+2.00 mg/L PP333下培养的朱顶红叶片短而宽,鳞茎大,具有抑制叶片生长促进鳞茎膨大的作用;在MS+4.00 mg/L 6-BA培养基中,蔗糖浓度为120 g/L时的鳞茎直径最大,为7.94 mm;最佳的生根培养基为MS+2.00 mg/L IBA,生根率为100%;朱顶红易于移栽,在试验的14种基质中成活率均为100%,其中泥炭土及混合基质椰糠:珍珠岩:蛭石=1:1:1和泥炭土:珍珠岩:椰糠=1:1:1三种基质中的朱顶红长势最好。(2)以威尼替舞花姜未开放的花蕾及由根茎萌发出的幼芽为外植体,用75%酒精棉球将外植体表面擦拭干净,再将外植体浸泡于75%酒精中30 s,0.10%HgCl2连续消毒5 min+3 min+2 min(花蕾外植体则连续消毒3 min+2 min+1 min),通过此三步消毒法获得较高的表面消毒成功率。在MS+2.00 mg/L 2,4-D+0.50 mg/L 6-BA和MS+5.00 mg/L 6-BA+0.01 mg/L NAA中进行初代培养,30 d后分别获得20.00%和80.95%的不定芽诱导率。由两种外植体诱导而来的不定芽的增殖倍数无显著性差异;最适合的增殖基本培养基为MS,在MS培养基中添加0.10 mg/L TDZ下不定芽直接进行体细胞胚发生,增殖倍数为16.46;最适合不定芽增殖的接种密度为每瓶15个单芽,培养30 d后不定芽的增殖倍数为7.28。最佳的生根培养基为1/2 MS+0.50 mg/L NAA,生根率100%;最佳移栽基质为泥炭土:蛭石=2:1,移栽30 d后成活率为100%。(3)以盐桦茎尖和茎段为外植体,用75%酒精棉球将外植体表面擦拭干净,再将外植体浸泡于75%酒精中30 s,0.10%HgCl2连续消毒5min+3 min+2 min,污染率最低,为34%。最适合盐桦不定芽诱导的基本培养基为B5培养基;在继代培养基MS+0.50 mg/L 6-BA+0.05 mg/L NAA中,接种每瓶20-25个带两个节位的茎段时增殖倍数最高,但不定芽较细弱;不定芽增殖最佳的培养基是MS+0.50 mg/L 6-BA,增殖倍数为31.04;在1/2 MS或MS培养基中添加0.50 mg/L IBA的培养基中有利于壮苗;在培养基中加入蔗糖30 g/L、45 g/L时茎干较粗;在壮苗培养中加入PP333能使盐桦试管苗茎干和根系变粗、植株矮化,浓度以0.50 mg/L最佳;3000 Lux光照强度培养条件下,盐桦组培苗长势最好;最佳生根培养基为MS+0.30 mg/L NAA,生根率为100%。最适于盐桦移栽的基质为河沙:泥炭土=1:1,移栽成活率为95%,小苗较健壮。
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