配子体自交不亲和反应候选基因和S-单倍型特异识别的初步研究

来源 :中国科学院遗传与发育生物学研究所 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xiaofyk
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自交不亲和性(Self-incompatibility,SI)是高等植物特有的一种自我识别机制。在配子体自交不亲和的茄科、玄参科和蔷薇科植物中,已知S-位点编码的S-RNases和SLF(S-locusF-box)蛋白分别控制花柱和花粉的自交不亲和性,但是,两者如何进行特异性识别导致自交不亲和反应的机理还不清楚。除了S-RNase和SLF以外,对其它参与自交不亲和反应的蛋白了解则更少。为了寻找花粉中其它参与自交不亲和反应的蛋白因子,我们以矮牵牛成熟花药构建的cDNA文库为基础,用酵母双杂交的方法筛选到了与S-RNase作用的蛋白PGP(PetuniaGerminatingPollen)S/D3及与AhSLF-S2作用的蛋白PhPME(PetuniahybridaPectinMethylesterase)。共转化酵母的结果表明PGPS/D3在酵母体内与S-RNase以及PhPME与SLF蛋白之间的相互作用都不具有S-单倍型特异性。对PGPS/D3的Southern分析表明它在基因组中以单拷贝存在,亚细胞定位的结果表明它可能在细胞膜和细胞质都有定位,而且在花柱,子房,花粉和叶子中都有表达。对PhPME的Southern分析表明它在基因组中以单拷贝存在,也不具有花粉表达的特异性。最后,为了研究决定SLF识别特异性的区域,我们克隆了矮牵牛中的一个SLF基因-PhSLF-Sv,并且与它的等位基因PhSLF-S3之间构建结构域互换载体转化自交不亲和的S3S3Petuniahybrida植株。同时,我们对SLF的旁系同源基因的功能进行了初步研究。酵母双杂交实验结果发现它们能够形成同源/异源二聚体或多聚体,提示这些蛋白可能以二聚体或多聚体形式在自交不亲和反应中发挥作用。
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