M3受体拮抗剂对子宫颈癌SiHa细胞的作用及机制研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lihai3120
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目的:研究M3型乙酰胆碱受体(M3 muscarinic acetylcholine receper, M3R)拮抗剂对子宫颈癌SiHa细胞的生长的影响及其机制。  方法:体外培养子宫颈癌SiHa细胞系,分别给予MR激动剂choline及M3R拮抗剂darifenacin或4-DAMP,MTT法检测细胞活力,划痕试验检测细胞迁移;流式细胞术检测细胞凋亡情况;蛋白质印记(Western blot)检测细胞内总细胞外调节激酶/磷酸化细胞外调节激酶(total extracellular signal-regulated kinase/phospho-extracellular signal-regulated kinase,t-ERK/p-ERK)和总核因子-κB/核内核因子-κB(total nuclear factor-κB/intranuclear factor-κB,t-NF-κB/n-NF-κB)蛋白表达量。  结果:MTT结果显示,choline能够促进SiHa细胞增殖,且在10-5mol/L时效果显著(P<0.05),而M3R拮抗剂darifenacin、4-DAMP能够阻断choline诱导的SiHa细胞增殖,且均在10-5mol/L时作用显著(P<0.05);划痕试验和流式细胞术结果显示,choline(10-5mol/L)促进SiHa细胞迁移,抑制其凋亡,darifenacin(10-5mol/L)或4-DAMP(10-5mol/L)逆转这些作用(P<0.05);Westernblot结果显示,choline(10-5mol/L)可以使p-ERK1/2和n-NF-κB蛋白表达升高,预先给予M3R拮抗剂darifenacin(10-5mol/L),4-DAMP(10-5mol/L),使p-ERK1/2和n-NF-κB蛋白含量表达明显下降(P<0.05)。  结论:M3受体拮抗剂抑制子宫颈癌SiHa细胞的增殖、迁移,并促进其凋亡,作用机制可能与MAPK/ERK1/2,NF-κB有关。
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