目的：观察硫酸乙酰肝素（heparan sulfate, HS）和阿霉素（adriamycin, ADM）联合应用的抗C3H小鼠移植乳腺癌作用，进一步探讨二药联用抗C3H小鼠移植乳腺癌作用机制。　　方法：1.HS的制备培养人乳腺上皮癌 MCF-7细胞株，待细胞生长达汇合期时收集培养液，DEAE-Sepharose-CL-6B离子交换色谱分离，紫外检测下收集峰组分、透析、蛋白含量测定、硫酸软骨素ABC酶化学降解其中的硫酸软骨素蛋白聚糖，5％～15％线性梯度 SDS－PAGE电泳分析，链霉蛋白酶降解硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（HSPG）的核心蛋白，降解产物经DEAE-Sepharose-CL-6B离子交换色谱柱、透析，得到硫酸乙酰肝素（HS）链，定量、分装、冷冻干燥备用。2.C3H小鼠移植乳腺癌模型制备取42只6周龄雌性C3H小鼠，于前肢腋窝皮下注射乳腺癌细胞悬液（8×107细胞/ml）0.2ml/只。3.抗乳腺癌作用观察将接种乳腺癌小鼠随机分成6组：生理盐水(NS,0.2ml/只)组、HS(15mg/kg)组、ADM(4mg/kg)组和 HS（15mg/kg）分别伍用高（4mg/kg）、中（2mg/kg）、低（1mg/kg）ADM剂量组。接种后第4天分别腹腔注射相应药物，NS、HS1次/天，ADM1次/5天，连续给药21天。（1）观察、测定肿瘤生长情况及小鼠的一般状况，绘制肿瘤生长曲线。用药结束后第2天取血处死小鼠，剥离肿瘤，称瘤体重量，计算抑瘤率；计算小鼠胸腺、脾脏指数，检测心肌酶水平，取左心室行病理检查。（2）Western-blot法测定肝素酶I（heparanase I, HRP I）的表达；（3）免疫组织化学法，检测HS链对小鼠肿瘤组织微血管密度(MVD)的影响；（4） Caspase-3活性检测试剂盒测定Caspase-3活性。　　结果：1.HS和ADM联合用药对小鼠乳腺肿瘤生长速度的影响给药结束后第2天处死小鼠，测定乳腺肿瘤体积，生理盐水组、单用HS组及单用ADM组分别为：2.05±0.50mm3，1.06±0.41 mm3和0.91±0.59 mm3，HS联合应用高、中、低剂量ADM组分别为0.68±0.28 mm3，0.82±0.42 mm3和0.72±0.33 mm3。各处理因素的抑瘤率分别为：HS21.61%，ADM31.02%，HS+ADM(H)55.21%， HS+ADM(M)42.92%，HS+ADM(L)44.74%。2. HS和ADM联合用药对小鼠免疫器官的影响生理盐水组、HS及HS与高、中、低剂量的ADM联用组小鼠的胸腺指数分别为2.75±1.12、2.89±0.97、2.57±0.87、2.75±0.82和2.82±0.92，各处理组之间无显著性差异（P>0.05），而 ADM处理组为1.20±0.05，表现为胸腺指数的显著降低（P<0.01或P<0.05）。脾脏指数，生理盐水组、HS及HS与高、中、低剂量的ADM联用组分别为6.03±2.15、6.31±1.88、2.54±1.33、5.71±1.44、5.88±1.93和6.02±1.84，亦表现为联合用药组对于脾脏功能的影响显著优于单用 ADM组。3. HS和ADM联合用药对小鼠心脏的影响 ADM处理组各心肌酶水平均高于生理盐水组和HS处理组（P<0.05），HS和ADM联用组对心肌酶的影响与生理盐水组、HS处理组无明显差别（P>0.05）。ADM组小鼠心脏切片显示有充血和心肌细胞肿胀、变形。4.HS和HS与ADM联用组HRP I的表达与生理盐水组、ADM组相比明显减少。5. HS和HS与ADM联用组的MVD明显低于阴性对照组与ADM组。6.HS和HS与ADM联用组的Caspase-3活性较阴性对照组明显提高（P＜0.01），与ADM组比较无明显差异（P＞0.05）。　　结论：　　1.HS和HS与ADM联合用药均能抑制C3H小鼠移植性乳腺癌肝素酶I的表达，减少微血管密度和增强Caspase-3活性。　　2.HS和HS与ADM联合用药能减慢C3H小鼠移植性乳腺癌的生长速度。有意义的是这一联合用药似不构成对荷瘤动物的胸腺、脾脏指数及总体情况的影响。　　3.HS与ADM可能具有协同抗肿瘤作用，这一联合用药可通过降低ADM的用量，降低后者的不良反应。