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背景在美国和欧洲,药物滥用导致的肝脏损伤是引起急性肝脏衰竭的常见的原因,迄今为止药物性肝损伤的发生率还在持续上升,已经作为一个重要的公共健康问题而被广泛研究。Ace-taminophen（APAP）是广泛应用于解热镇痛的药物之一,曾经有报道称每周有超过6千万的美国人定期服用APAP,虽然在安全剂量的前提下服用APAP是安全可靠的,但是动物实验和基于收集到的患者的数据表明过剂量APAP可以导致严重的肝损伤,甚至急性肝衰竭。我们先前的研究表明过剂量APAP可诱导较低水平的小鼠肝脏自噬,而m TOR抑制剂rapamycin激活自噬,同时减轻APAP导致的肝毒性,而chloroquine抑制自噬加重小鼠肝毒性。这些结果表明自噬在APAP过剂量导致的急性肝脏损伤中起重要的作用,但是m TOR信号通路在APAP诱导的急性肝损伤中的作用尚不清楚。综上,基于既往研究结果及相关亟需解决的问题,本研究着眼于m TOR信号通路在APAP诱导的急性肝损伤中的作用,并探讨其作用机制。目的研究m TOR信号通路在APAP诱导的急性肝损伤中的作用及其机制。方法1.本研究采用野生型（Wide type,WT）小鼠、m TOR肝脏特异性敲除(m TOR-/-)、Raptor肝脏特异性敲除(Raptor-/-)和TSC1肝脏特异性敲除(TSC1-/-)小鼠,构建APAP诱导的急性肝损伤模型。2. 检测对照组与实验组小鼠血清谷丙转氨酶（ALT）水平,用以衡量APAP诱导的肝损伤的程度。3. 取小鼠肝脏组织,检测对照组与实验组小鼠肝脏的GSH水平,反映肝脏的APAP的代谢情况。4. 取对照组和实验组小鼠的肝组织固定于4%甲醛溶液中,石蜡包埋后切片进行苏木精-伊红（Hematoxylin and eosin,H&E）染色,观察肝脏病理改变。通过Tunel染色,观察肝组织凋亡情况。PCNA免疫组化染色检测细胞核中PCNA表达,用以反映细胞的增殖状态。5. 蛋白免疫印记技术（Western blot,WB）定量检测对照组和实验组小鼠肝组织中APAP代谢酶（CYP2E1）以及代谢产物（APAP Adducts）,反映APAP代谢情况。检测小鼠肝脏中自噬相关蛋白（LC3/P62）和m TOR下游蛋白（S6/4EBP1）以及m TOR下游蛋白磷酸化情况（P-S6/P-4EBP1）,反映自噬情况。检测小鼠肝脏组织中凋亡信号通路蛋白（JNK）以及凋亡蛋白（P-JNK）激活情况。结果在小鼠肝脏特异性敲除m TOR和肝脏特异性敲除Raptor失活m TOR,构建APAP诱导的急性肝损伤模型后,发现小鼠生存率提高,血清ALT水平小幅度下降,肝脏呈现病理性变化。进一步探究机制发现,基因失活m TOR可能促进自噬发生,但是小鼠肝再生能力下降,另外,小鼠肝脏特异性敲除m TOR后,APAP处理可能引起更高的JNK凋亡蛋白的激活。为了进一步探究m TOR在APAP诱导的肝损伤中的作用,肝脏特异性敲除TSC1激活m TOR,构建APAP诱导的急性肝损伤后,发现基因m TOR激活,APAP处理后小鼠血清ALT水平上升,肝损伤加重,但是生存率也提高,自噬水平没有明显变化,小鼠肝脏的凋亡信号通路蛋白JNK磷酸化水平可能随时间延长而上调。结论基因失活m TOR可能促进自噬,但是损害了细胞增殖并引起JNK凋亡蛋白的激活,减轻APAP诱导的肝损伤,提高了生存率。