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目的强制性运动疗法(constraint-induced movement therapy,CIMT)广泛地应用于神经康复领域,并被证实能够有效地促进肢体功能的恢复。应用功能磁共振成像和经颅磁刺激等方法发现,CIMT通过促进脑功能重组而改善脑梗死患者的患肢功能。神经系统具有很强的可塑性,而神经再生是神经可塑性的重要组成部分。脑梗死后康复训练能够影响神经再生,进而对神经功能恢复产生影响。神经再生主要包括内源神经干细胞的激活与神经元轴突的再生,是脑梗死后功能恢复的结构基础。中枢神经系统内的胶质细胞生成的许多物质,包括勿动蛋白(Nogo)、髓鞘相关糖蛋白(myelin associated glucoprotein,MAG)、少突胶质细胞髓鞘糖蛋白(oligodendrocyte myelin glucoprotein,Omgp),均能抑制受损神经元轴突的再生。上述各种物质是与Nogo受体结合后通过激活Rho激酶而发挥其抑制作用的。间质细胞源性因子-1(strornal cell-derived factor-1,SDF-1)是骨髓间质细胞产生的CXC类趋化蛋白。有研究发现脑缺血后的为期3周的CIMT使大鼠缺血侧脑皮质内SDF-1蛋白的表达明显上调,而且明显地促进了运动功能的恢复。SDF-1/CXCR4不仅能够促进神经干细胞的动员、迁移和归巢,而且还能够通过抑制Rho激酶活性来促进神经元轴突延伸。从而推断:脑缺血后CIMT有可能通过激活内源性神经干细胞及促进神经元轴突再生而改善神经功能。然而,目前国际上关于CIMT的研究大都采用影像学手段及行为学手段从功能角度进行,很少有研究深入到细胞分子水平探讨它对脑缺血后神经再生的作用及相关机制。为了验证上述假设,本研究应用雌性Sprague-Dawley大鼠,研究CIMT对大鼠脑缺血再灌注(ischemia-reperfusion,I/R)后神经功能恢复及Rho激酶表达的影响,从而为脑梗死的临床治疗提供新的理论基础。方法选择健康雌性Sprague-Dawley大鼠75只,将其随机分为强制性运动疗法组(CIMT组)25只,缺血再灌注组(I/R组)25只和假手术组(sham组)25只,CIMT组和I/R组制作成左侧大脑中动脉缺血再灌注模型。3组大鼠再采用随机区组法分为I/R后7d,14d,21d,28d,35d时处死组。CIMT组从I/R术后7d开始进行左前肢固定。3组大鼠在I/R术后第7d、14d、21d、28d、35d进行Bederson评分、梯形平衡木试验、Morris水迷宫试验以评价神经功能缺损的恢复情况,并应用Western blot方法检测缺血侧大脑皮质的Rho激酶表达水平。结果1、CIMT对大鼠脑I/R后神经功能缺损的影响随着缺血和强制性运动时间的延长,两组神经功能缺损症状都逐渐减轻。与I/R组比较,在脑缺血再灌注术后14d和21d,CIMT组的肢体运动、平衡能力及学习记忆功能均明显恢复(P＜0.05),28d和35d时两组间神经功能比较差异无统计学意义。2、CIMT对大鼠脑I/R后Rho激酶表达的影响CIMT组大鼠的Rho激酶的表达水平在强制性运动后14d(脑缺血再灌注术后21d)时下降达最低水平,在强制性运动后28d(脑缺血再灌注术后35d)恢复到正常水平。I/R组在缺血再灌注术后14d时Rho激酶亦有所下降。两组在脑缺血再灌注术后14d和21d的Rho激酶水平比较差异有显著性意义(P＜0.05),CIMT组大鼠的Rho激酶显著低于I/R组(P＜0.05),Rho激酶下降的持续时间更长。结论1、CIMT能够显著提高大鼠脑缺血再灌注后的运动功能、平衡能力及学习记忆功能(P＜0.05)。2、CIMT能够下调大鼠脑缺血再灌注后Rho激酶的表达,而且在I/R后21d最明显,以后随着时间推移逐渐恢复到正常水平。