[背景和目的]胆囊癌是发生在胆囊管以及胆囊底部、体部、颈部的高度恶性肿瘤,由于胆囊癌早期缺乏特异性症状,并且极易发生淋巴转移及远处脏器转移,所以大多数患者诊断时已是晚期、失去了外科手术机会,而目前放疗、化疗等传统治疗手段并未在晚期胆囊癌中体现出显著的疗效优势,故胆囊癌患者总体预后极差,严重威胁着人类健康,因此探索新的方法来治疗胆囊癌、改善患者预后是非常重要的。血管生成已经通过血管内皮生长因子(VEGF)信号通路抑制剂在很多肿瘤中被证实是一个很有前景的治疗靶点,使得抗血管生成靶向治疗恶性肿瘤的作用越来越得到肯定。阿帕替尼是一种新型小分子酪氨酸激酶抑制剂,能够高度选择性的抑制血管内皮生长因子受体-2(VEGFR-2),具有良好的靶向抗肿瘤血管生成和抑瘤活性。多项研究结果显示阿帕替尼在多种肿瘤体内移植模型中均显现出了良好的抑瘤作用,且耐受性良好,但目前尚未有相关实验进行过阿帕替尼对胆囊癌的体内抑瘤作用的研究,因此探索阿帕替尼对于胆囊癌的抑瘤作用是非常有意义和价值的。本研究通过建立人胆囊癌GBC-SD裸鼠皮下移植瘤模型,采用阿帕替尼分高、低两种剂量进行治疗,并以生理盐水灌胃处理的荷瘤裸鼠作为安慰剂对照组,初步探讨阿帕替尼对胆囊癌的体内抑瘤作用,验证阿帕替尼对胆囊癌的治疗作用,为研究阿帕替尼的临床应用提供依据。[材料和方法]选择人胆囊癌GBC-SD细胞株进行细胞培养。选取5-6周龄SPF级BALB/c-nu雌性裸鼠作为实验动物。将对数期生长的GBC-SD细胞悬液注射于裸鼠右侧腋窝皮下,.建立人胆囊癌裸鼠移植荷瘤模型。接种2周待移植瘤生长至一定大小后,选择肿瘤体积相近的裸鼠24只,随机分成3组,并按以下方案给药:①对照组(8只),予以生理盐水灌胃,每天一次;②低剂量阿帕替尼组(8只):给予生理盐水稀释的甲磺酸阿帕替尼混悬液,剂量为100 mg/kg,每天1次,灌胃给药;③高剂量阿帕替尼组(8只):阿帕替尼混悬液剂量为200mg/kg,每天1次,灌胃给药。治疗过程中每隔3天称量肿瘤体积,并计算相对肿瘤增长率T/C(%)评价药物对肿瘤的抑制作用。14天后停止给药,裸鼠在最后一次给药24 h后,解剖小鼠,完整切除裸鼠皮下胆囊癌组织,胆囊癌组织石蜡包埋,光镜下观察胆囊癌移植瘤细胞形态,采用免疫组化(利用CD31标记肿瘤微血管数目、Ki67标记肿瘤细胞增殖状态、VEGFR-2表达阳性标记血管内皮细胞生长因子受体2)来检测阿帕替尼的抗胆囊癌疗效及作用机制。[结果]1.给药第9天后,两个治疗组移植瘤体积增长明显小于安慰剂对照组(P<0.05)。第12天、第15天低剂量组、高剂量组肿瘤体积均显著低于对照组(p<0.05),且高剂量组移植瘤体积同低剂量组间的差异有统计学意义(p<0.05);2.给药2周后,低剂量阿帕替尼组(100mg/kg Qd)与高剂量阿帕替尼组(200mg/kg Qd)相对肿瘤生长率分别为70.21%与59.46%。3.治疗14天后,100mg/kg阿帕替尼组和200mg/kg阿帕替尼组微血管数目均小于对照组(19.98±2.76 VS 25.92±2.88,P=0.001;12.99±2.75 VS 25.92±2.88,P<0.001),高、低剂量组间微血管数目的差异具有统计学意义(12.99±2.75 VS 19.98±2.76,P=0.003)。4.治疗14天后,100mg/kg阿帕替尼组及200mg/kg阿帕替尼组Ki67阳性细胞的比值均显著小于对照组(37.42±4.99VS 53.28±8.72,P=0.001;26.19±3.63VS 53.28±8.72,P<0.001),高、低剂量组间 Ki67 阳性细胞的比例有显著性差异(26.19±3.63VS 37.42±4.99,P=0.003)。5.治疗14天后,100mg/kg阿帕替尼组及200mg/kg阿帕替尼组VEGFR-2抗体的阳性细胞表达比值均显著小于空白对照组(21.5’7±5.01 VS 32.56±4.43,P=0.001;15.23±2.13VS32.56±4.43,P<0.001),高、低剂量组间VEGFR-2阳性细胞比值有显著性差异(15.23±2.13 VS 21.57±5.01,P=0.025)。[结论]1.阿帕替尼能够抑制人胆囊癌GBC-SD裸鼠移植瘤的生长,200mg/kg Qd的阿帕替尼对人胆囊癌GBC-SD裸鼠移植瘤的抑制作用比100mg/kg Qd的阿帕替尼更明显。2.阿帕替尼可以抑制胆囊癌组织VEGFR-2的表达,降低组织中的微血管密度以及癌细胞的增殖。