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目的：SOX9(Sex-determining Region Y box9)是与位于Y染色体上的性别决定基因(SRY基因)同源的基因，参与胚胎早期多种器官的发育。最近研究发现在肿瘤中SOX9通过介导上皮细胞间质转分化(epithelial to mesenchymal transition，EMT)促进肿瘤细胞的转移，在肝脏、心脏等组织器官纤维中SOX9通过促进细胞外基质(extracellular matrix，ECM)产生参与纤维化。然而，SOX9在肾脏纤维化的发生发展中的作用及潜在机制仍未知，故本研究主要探讨SOX9在肾小管上皮细胞纤维化中作用及其机制。 方法：(1)制备UUO模型，选取180-200g的Wister雄性大鼠24只，随机分为4组（每组6只）：假手术组(Sham组)、UUO后3天组，UUO后7天组，UUO后14天组，在WO组中，通过中线切口暴露左侧输尿管，并在肾盂下方15mm处用4.0丝完全结扎。Sham组手术方法相似，但没有结扎输尿管。荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,qPCR)和免疫印迹(Western bloting，WB)法检测E-cadherin、波形蛋白(Vimentin)、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)和纤维连接蛋白(Fibronectin，FN)在mRNA和蛋白水平表达量，及Masson染色观察肾脏纤维化程度以验证造模是否成功。通过qPCR、WB及免疫组化检测SOX9表达水平;(2)体外培养大鼠肾小管上皮细胞(Rat Renal Tubular Epithelial Cells，NRK-52E)，并转染SOX9慢病毒及空载病毒，qPCR和WB法检测E-cadherin、Vimentin、Ⅰ型纤溶酶原激活剂抑制物(plasminogen activator inhibitor-1，PAI-1)、CollagenⅠ、Fibronectin和CTGF mRNA和蛋白表达水平;(3)为研究可能的机制，我们检测在肾小管上皮细胞中过表达SOX9后是否激活Wnt信号通路。qPCR和wB法检测β-catenin的mRNA和蛋白表达水平。qPCR法检测Wnt受体Fzd5及Wnt信号通路靶基因如c-MYC和TCF4的mRNA水平;(4)为进一步了解SOX9如何调控肾小管EMT和ECM沉积，通过mRNA转录组测序及生物信息学分析筛选SOX9可能的作用机制。 结果：(1)UUO大鼠的肾组织中，SOX9mRNA和蛋白表达水平明显升高，且呈时间依赖性。免疫组化结果显示SOX9主要在肾小管上皮细胞中高表达。(2)NRK-52E细胞中过表达SOX9后，Vimentin、PAI-1、CollagenⅠ、Fibronectin和结缔组织生长因子(connective tissue growth factor，CTGF)mRNA和蛋白表达升高。在NRK-52E细胞中过表达SOX9加重了TGF-β1诱导的Vimentin、PAI-1、CollagenⅠ、Fibronectin和CTGFmRNA和蛋白表达，同时显著抑制E-cadherin的表达。细胞免疫荧光同样证实SOX9加重TGF-β1诱导的CollagenⅠ和Fibronectin表达。(3)在NRK-52E细胞中过表达SOX9后，Wnt信号通路的重要介质β-catenin mRNA和蛋白表达与对照组相比无统计学差异，且SOX9的过表达并不影响Wnt受体Fzd5及其靶基因如c-MYC和TCF4的mRNA表达。(4)通过mRNA转录组测序及生物信息学分析，发现在NRK-52E细胞中过表达SOX9后有317个差异表达基因（|差异倍数|＞2和P＜O.05)，其中包括174个上调基因和143个下调基因。通过GO分析发现这些基因与细胞外空间、细胞外区域部分，收缩纤维部分高度相关。通过KEGG信号通路富集发现SOX9参与PI3K-AKT信号通路和HIF-1信号通路。进一步研究发现过表达SOX9后磷酸化的AKT表达升高。 结论：体内研究证实SOX9在UUO大鼠肾小管上皮细胞中表达明显升高。体外细胞水平证实过表达SOX9可促进NRK-52E细胞EMT和ECM沉积，并且研究发现SOX9与TGF-β1具有协同作用。此外，mRNA转录组测序及生物信息学分析表明PI3K-AKT信号通路在SOX9介导的肾小管EMT和ECM聚集中发挥重要作用。总之，我们目前的研究表明SOX9通过PI3K-AKT途径促进肾小管EMT和ECM沉积。