精甲霜灵主要是甲霜灵的R型异构体组成,精甲霜灵对引起植物枯萎病、根腐病的丝核菌属等土壤真菌是有效的,尤其是对担子菌纲特别有效。(R)-N-(2,6-二甲苯基)氨基丙酸甲酯(CR)-DMPM)是合成精甲霜灵的关键手性中间体,目前(R)-DMPM的制备主要是化学制备法,但反应条件苛刻、环境污染大、光学纯度不高。作为一种环境友好的合成方法,生物催化剂催化制备化工产品吸引了越来越多人的眼球,与化学催化剂相比,全细胞催化剂简单易得,成本低廉,而且在工业生产中具有更好的稳定性和适应性。本论文从土壤中筛选得到了一株对外消旋DMPM具有较好立体选择性水解活性的菌株,经16SrDNA测序,初步鉴定为不解糖假苍白杆菌,并命名为不解糖假苍白杆菌WZZ003(Pseudochrobactrum asaccharolyticum WZZ003),保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏号为:CCTCCM 2014209。本论文对菌株Pseudochrobactrum asaccharolyticum WZZ003 发酵产酶条件进行了初步优化,最适产酶培养基组成为:酵母膏10g/L,蛋白胨 5 g/L,NaC10.5 g/L,MgSO40.01 g/L,初始 pH 为 7.0。菌株Pseudochrobactrum saccharolyticum WZZ003 接种于最适产酶培养基,在30L通风式发酵罐中,30℃培养24h,生物量为6.18g/L,酶活力 118.57 U/L。论文成功利用不解糖假苍白杆菌WZZ003冻干菌粉不对称水解(R,S)-DMPM 制备(R)-N-(2,6-二甲苯基)氨基丙酸(R)-MAP-acid),并对生物拆分反应关键参数(反应温度、pH、转速、底物浓度)进行优化,得到最适反应条件如下:底物浓度和不解糖假苍白杆菌WZZ003菌体加入量分别为0.256 mol/L和50 g/L,在30℃转速为250 rpm水浴摇床反应48h,(R)-MAP-acid的e.e.值可达98.0%以上,转化率接近50%。论文将催化反应体系在最优条件下扩大到3 L,研究不解糖假苍白杆菌WZZ003催化高底物浓度(0.256 mol/L)反应,根据(R)-MAP-acid和(S)-DMPM之间化学性质差异,利用乙酸乙酯萃取对上述物质进行分离,最终得到产物(R)-MAP-acid 45 g,e.e.值为97.3%。