论文部分内容阅读
我们设计并合成了三个含双烷基位阻的手性配体及其15个新型位阻铂(Ⅱ)配合物,包括：(1)以N1,N2-二正丁基取代的1R,2R-环己二胺(1R,2R-DACH)为配体,氯离子和常见二羧酸根为离去基团的位阻型铂(Ⅱ)配合物(5个)；(2)以N1,N2-二异丁基取代的1R,2R-DACH为载配体,氯离子和常见二羧酸根为离去基团的位阻型铂(Ⅱ)配合物(5个)；(3)以N1,N2-二正戊基取代的1R,2R-DACH为配体,氯离子和常见二羧酸根为离去基团的位阻型铂(Ⅱ)配合物(5个),常见二酸包括草酸(ox)、丙二酸(mal)、环丁二酸(CBDA)及对羟基环丁二酸(HOCBDA),并通过元素分析、红外光谱、核磁共振氢谱和碳谱、质谱等对配体和配合物进行了结构确证。通过MTF法测定了15个配合物对人非小细胞肺癌细胞株A549、人胃癌细细SGC-7901,人结肠癌细胞株HCT-116和人肝癌细胞株HepG-2的体外抗肿瘤活性,发现一些配合物对这些细胞株表现较为明显的抑制作用。据此,对在体外测试中显示较高活性的配合物4进行了更多的抗肿瘤活性研究,结果表明配合物4对所测的所有细胞都表现出了理想的抗癌活性,对某些肿瘤细胞的细胞毒活性与顺铂相当,稍好于奥沙利铂,远优于卡铂,这些结果说明手性环己二胺上N1,N2-烷基取代基的结构及链长对配合物的活性有不同的影响。配体中取代基含有4个碳原子的链状烷基的配合物的活性最为突出,其中,正丁基的效果要优于异丁基位阻铂配合物的效果,而取代基为正戊基时铂配合物基本无细胞毒活性,这可能是空间位阻效应导致的。由于异丁基和正戊基的空间位阻太大,配合物难以与DNA加合。螯合二羧酸作为阴离子配体使配合物的水溶性大大增加,而且与对应的二氯铂配合物相比,配合物4也表现了对癌细胞比较广谱的活性。总体而言,1R,2R-DACH胺基上连接N1,N2位的双正丁基对配合物的整体活性起到关键的作用。此外,作用机制研究结果表明配合物4是通过诱导细胞凋亡并阻滞细胞于G2/M期,来抑制癌细胞的增殖。Western Blot研究结果表明铂配合物诱导的凋亡在某种程度上可能是由线粒体依赖的凋亡路径导致的。通过核酸琼脂糖凝胶电泳方法探究了配合物4与DNA的相互作用,但是在与顺铂和奥沙利铂同样条件下,配合物4与DNA作用却没有明显反应,这可能是配合物4的烷基位阻效应导致,这也从另一方面说明了配合物4可能具有与顺铂和奥沙利铂不同的作用机制,或许能够克服顺铂的耐药性。