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背景与目的造血干细胞移植(hematopoietic stem cell transplantation,HSCT)是血液系统恶性肿瘤有效的治疗手段,血小板减少(thrombocytopenia,TP)是移植后常见的并发症。多项研究表明血小板减少是影响移植后患者预后的重要因素,但其具体发病机制尚不完全明确。我们通过检测移植后血小板减少患者的相关指标,并进行体外巨核细胞培养及药物干预实验,探讨移植后血小板减少发生的可能机制,力求为移植后血小板减少的治疗提供一个新的方向。方法收集并统计苏州大学附属第一医院2016年3月至2016年10月行异基因造血干细胞移植后血小板减少(HSCT-TP)46例患者的临床资料及骨髓标本。研究纳入标准为:造血干细胞移植后≥60天后,血小板计数≤50×109/L持续7天以上,且粒系及红系重建良好。并收集同期造血干细胞移植后造血重建良好患者(good graft function,GGF)40例、健康志愿者(healthy donor,HD)20例资料及骨髓标本。对患者临床特征进行方差分析,并统计骨髓形态涂片中巨核细胞数目,通过流式细胞仪及Elisa方法分别检测骨髓血小板相关抗体及巨核细胞相关抗体阳性率,巨核细胞凋亡比例及多倍体分布,骨髓上清促血小板生成素(thrombopoietin,TPO),细胞基质衍生因子(stromal-derived factor 1,SDF-1)水平,骨髓细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平,并进行体外小鼠巨核细胞培养及药物干预后检测巨核细胞多倍体及ROS变化。结果(1)对患者临床特征的方差分析结果显示HSCT-TP及GGF两组患者在性别,年龄,疾病分类,移植类型,ABO血型相合,干细胞来源等方面均无明显差异(P>0.05),具备可比性;(2)骨髓形态涂片提示HSCT-TP组患者巨核细胞数目明显低于GGF组患者(22.5±3.1 vs 64.0±4.9,P<0.0001),且其巨核细胞出现成熟障碍,大于8倍体巨核细胞比例明显低于GGF及HD组(16.9%vs 66.9%vs 73.6%,P<0.05),但巨核细胞细胞凋亡比例无明显变化(P>0.05)。HSCT-TP患者骨髓TPO水平明显高于GGF及HD 组(1203±178.8pg/ml vs 228.8±32.36 pg/ml vs 36.07±8.430 pg/ml,P<0.0001);(3)HSCT-TP组患者巨核细胞相关抗体阳性率明显高于GGF组及HD组(19.46±2.53%vs 13.34±1.24%vs 12.99±1.76%,P=0.03),但三组间血小板相关抗体阳性率无明显差异(P>0.05);(4)HSCT-TP 组患者骨髓 SDF-1 水平高于 HD 组(1283±186.8 pg/ml vs 804.2±99.46 pg/ml,P=0.04),但两组均明显低于 GGF 组(1283±186.8 pg/ml vs 804.2±99.46 pg/ml vs 2372±277.9 pg/ml,P<0.001),并且 HSCT-TP 组患者巨核细胞内ROS水平明显低于GGF组患者(P<0.05);(5)体外小鼠巨核细胞培养加地西他滨干预结果提示地西他滨可促进巨核细胞成熟,提高细胞内ROS水平。结论(1)造血干细胞移植后血小板减少患者骨髓巨核细胞的生成及成熟出现障碍,自身反馈调节机制及外源性因素可能导致体内TPO水平升高;(2)造血干细胞移植后血小板减少可能与体内相关抗体介导的巨核细胞破坏增多有关;(3)骨髓微环境受损及细胞内ROS稳态的破坏可能也参与了移植后血小板减少的发生。