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背景:肝细胞癌(Hepatocellularcarcinoma,HCC)发病率高,预后差,早期确诊手术根治是最佳治疗手段。然而临床确诊HCC患者多数处于中晚期,手术切除率低,缺乏有效的治疗手段。临床试验证明,针对肿瘤细胞发生机制中标志性的靶点进行有效干预的分子靶向药物索拉非尼能显著改善晚期HCC患者的病情。然而只有部分患者受益,部分患者出现耐药现象,即使联合用药疗效亦不满意。最近关于microRNAs(MiRNAs)分子机制方面的研究提示,miRNAs可能调节的各种信号通路的调节[22],miRNAs的失调,对索拉非尼耐药反应中起着不同的作用,它可能是导致索拉非尼耐药的原因。本研究旨在揭示miR-223与mRNA靶标F-box和含WD重复结构域7(FBW7)的调节关系,以及两者参与调节HCC对索拉非尼的耐药的作用关系。目的:研究microRNA-223在肝癌细胞系的表达情况,并研究其通过靶向调控FBW 7与肝细胞癌对索拉非尼的耐药的关系和机制。方法:研究观察miR-223表达与不同HCC细胞系对索拉非尼治疗的敏感性之间的关系。在索拉非尼不同敏感性的HCC细胞系中,使用RT-PCR测定miR-223表达。将miR-223 inhibitor,miR-22 3mimic 和含有 FBW7 siRNA 转染到 HCC 细胞中以调节miR-223和FBW7的表达水平。使用EdU和CCK-8检测评估细胞增殖。使用WB观察FBW7蛋白质表达水平。TargetScan网络服务器预测FBW7是miR-223的靶标,通过WB证实。结果:1、HCC细胞对索拉非尼的活力从高到低依次是Huh7,SNU449和SNU387;IC50依次为 8.749±0.876μM,13.4±1.05μM 和 15.72±1.58μM,miR-223 的表达水平与索拉非尼IC50表现呈相同的趋势。2、增加miR-223的表达能促进HCC细胞的活力。抑制miR-223的表达能显著增加索拉非尼对HCC细胞的治疗效果,敏感性增加。3、TargetScan预测FBW7就是miR-223的潜在靶标。分别增加或减少miR-223的表达,发现随着miR-223表达的变化HCC细胞中的FBW7表达有相应的变化。miR-223的过表达能显著抑制FBW7,同时在降低miR-223表达的HCC细胞中观察到相反的作用。4、索拉非尼治疗后,抑制FBW7表达能使HCC细胞活力增加同时具有更高的EdU阳性率。5.用FBW7 siRNA和FBW7 siRNA+miR-223抑制剂转染的HCC后,细胞活力没有差异。WB证实FBW7 siRNA可以消除miR-223抑制剂对增加FBW7表达的作用。结论:在具有索拉非尼耐药的HCC细胞中,miR-223的表达明显上调。降低miR-223的表达,可以调节增加靶基因FBW7的表达,从而显着增强HCC细胞对索拉非尼的敏感性,提示miR-223可能是克服索拉非尼耐药的新治疗靶标。