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硅藻是海洋生态中最重要的自养生物和海洋生态系统中能量流动和物质循环的基础。鞘脂种类和含量的变是鞘脂类从头合成途径中的第一限速酶,在调节鞘脂代谢中起着枢纽作用,影响化对于生物体的生长增殖和衰亡起到至关重要的作用。丝氨酸棕桐酰转移酶(SPT)各种鞘脂类成分在体内的合成、分布及功能。 本研究选取已完成全基因序列测定的假微型海链藻,研究假微型海链藻中SPT的克隆、表达及与鞘脂合成的关系。首先从假微型海链藻的基因组中克隆并鉴定了 SPT-LCB1基因片段,大小为1206 bp;在此基础上构建了 SPT-LCB1-pET-28a表达载体并于E.coli BL21中进行诱导表达,获得分子量为44.1 kDa的蛋白,由401个氨基酸组成,大部分以不可溶的包涵体的形式存在于大肠杆菌中;同时运用实时荧光定量 PCR技术以及 UPLC-MS分析技术,分别检测不同培养条件下的假微型海链藻中 SPT的表达量与其鞘脂含量,结果表明假微型海链藻中 SPT的表达与细胞中鞘脂的合成和积累具有一定的相关性,SPT在一定程度上能调节微藻细胞中鞘脂的合成,但并非是控制假微型海链藻鞘脂合成的唯一因素,其中还可能涉及到更多功能基因的时序表达。实验结果为今后关于假微型海链藻鞘脂代谢及该藻的生长、衰亡和代谢的研究提供了理论依据。