【摘 要】
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目的 用抗肿瘤药羟喜树碱(HCPT)作用于人肾上腺皮质癌SW-13细胞,观察其对SW-13细胞增殖、凋亡的影响,并从分子水平研究羟喜树碱对SW-13细胞Wnt信号通路抑制因子DKK-1(Dickkop
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目的 用抗肿瘤药羟喜树碱(HCPT)作用于人肾上腺皮质癌SW-13细胞,观察其对SW-13细胞增殖、凋亡的影响,并从分子水平研究羟喜树碱对SW-13细胞Wnt信号通路抑制因子DKK-1(Dickkopf-1)及Wnt信号通路关键调节因子的β-catenin的表达,探讨羟喜树碱抑制SW-13细胞增殖、促进凋亡的可能分子作用机制。方法体外培养人肾上腺皮质癌SW-13细胞,以浓度为0.25、0.5、1.0、2.0、4.0ug/mL的HCPT分别处理24、48、72h后,采用CCK8法测定细胞生长抑制率,计算出HCPT的IC50并选择最佳作用时间;并以IC50作为后续实验浓度,分为HCPT干预组与对照组,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;利用荧光定量PCR检测细胞DKK-1和β-catenin的mRNA水平,免疫细胞化学检测DKK-1和β-catenin蛋白的表达。结果 不同浓度HCPT分别作用24h、48h、72h后,SW-13细胞的生长增殖均明显受抑制(P<0.05),并呈一定的时间及浓度依赖性;流式细胞术显示SW-13细胞在HCPT千预组较对照组凋亡率高(P<0.05),荧光定量PCR和免疫细胞化学均显示HCPT干预组较对照组DKK-1表达明显升高(P<0.05),而β-catenin的表达则无明显变化(P<0.05)。结论 HCPT可以明显抑制人肾上腺皮质癌SW-13细胞的生长增殖,促进其凋亡。HCPT可以上调人肾上腺皮质癌SW-13细胞DKK-1的表达,但DKK-1表达的增加,并未引起β-catenin mRNA水平及蛋白定位的改变。因此,诱导DKK-1表达的增加,可能是HCPT抑制细胞增殖、促进凋亡的作用机制之一,而DKK-1可能通过其它途径抑制细胞增殖,促进凋亡,并不一定通过介导Wnt/β-catenin信号通路起抗肿瘤作用。
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