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1目的腹部手术后胃肠动力障碍以保守治疗为主,中医药在术后应用较少,本次通过胃癌术后芪黄煎剂的应用,临床的目的旨在研究术后胃肠激素对胃肠功能的影响,动物实验重心是探讨神经内分泌分子机制。2方法2.1.1病例分组方法:选择符合胃癌诊断的患者83例,按照随机数表法结合信封法按1:1平行随机和中途剔除不合格病例,最终分配对照组39例和芪黄煎剂44例组。2.1临床观察2.1.2治疗方法:(1)对照组:入院后完善术前准备,排除手术禁忌后行胃癌根治术(术式采用毕Ⅱ式或Roux-en-Y式),手术后1d予肠内营养支持,2/d,持续7天,余等常规治疗。(2)研究组:在对照组治疗的基础上,于肠内营养后15min,经肠内营养管滴注芪黄煎剂150ml。2.1.3观察指标及其检测方法:(1)观察胃肠排空(肠鸣音恢复时间、肛门排气排便和进食时间):专人听诊法;(2)胃肠造影:泛影葡胺造影法;(3)并发症及急性胃肠功能损伤(AGI)分级情况(记录分组法)。(4)并研究胃肠激素的分泌情况[促进激素:胃泌素(gastrin,GAS)、胃动素(motilin,MOT)、胆囊收缩素(cholecystokinin,CCK)和抑制激素:抑胃肽(Gastric inhibitory peptides,GIP)、血管活性肽(vasoactive peptide,VIP)、生长抑素Somatostatin,SS)]:平衡饱和分析方法及放射免疫法。2.1.4统计学方法:采用SPSS21.0(SPSSInc,Chicago,IL,USA)统计软件进行数据分析。计量资料正态资料采用(?)±s,非正态资料用M(范围)表示,两独立样本资料采用独立样本t检验或秩和检验(Mann-Whitney U检验);多组配对资料采用重复测量的方差分析(Repeated ANOVA)或秩和检验(Friedman检验),事后两两比较检验采用LSD;计数资料以例数或百分比表示采用,理论数T≥5并且总样本量n≥40比较采用Pearson x2检验,否则采用Fisher确切概率法检验。P<0.05认为差异有统计学意义。2.2动物实验2.2.1造模和分组方法:采用我们先前研究肠内营养置管技术,建立肠内营养导管管空肠营养通道。将80只。然后用随机数字表法将其均分为4组,每组20只,分为假手术组,标准肠内营养组,免疫肠内营养组,芪黄煎剂组。2.2.2各组干预方法:假手术组不行胃切除,仅腹部正中切开后缝合,手术后自由进食水。标准肠内营养组、免疫肠内营养组,芪黄煎剂组。分别术后第1d予以,瑞素(Fresubin,华瑞制药有限公司)120k J/kg.d,瑞能(Supportan,华瑞制药有限公司)120k J/kg.d及芪黄煎剂5g/(kg.d)+瑞素120k J/kg.d。持续7d。2.2.3观察指标及检测方法:取出距离幽门10cm的上部小肠,切成大小片段(100mg),液氮冷冻。RT-PCR方法检测ACh E、SP、VIP、NOS、M3R、VIP2R、NK1R m RNA表达水平和Western blot方法检测其转录后蛋白翻译情况。2.2.4统计学方法:采用统计软件SPSS21.0(SPSS Inc,Chicago,IL,USA)进行数据分析,计量资料以(?)±s表示,数据满足正态分布时采用单因素方差分析(AVOVA)检验,否则采用Kruskal-Wall秩和检验,事后两两比较若满足方差齐则采用LSD法,否则采用Dunnett,s法,采用双侧检验,P<0.05认为差异有统计学意义。3.结果3.1临床观察结果3.1.1芪黄煎剂组和对照组术后胃肠排空的时间、泛影葡胺造影、胃肠道并发症情况及AGI分级比较:芪黄煎剂组术后胃肠排空时间:肠鸣音恢复、肛门排气排便、恢复进食及泛影葡胺造影:到达升结肠、横结肠、降结肠时间明显缩短(P=0.002、P=0.006、P=0.005、P=0.001及P=0.003、P=0.023、P=0.038);腹痛腹胀及AGIⅡ～IV级例数明显降低(P=0.037及P=0.041)。3.1.2芪黄煎剂组和对照组术后胃肠激素的变化:组内比较,两组术后3天降低最低,术后14天与术前比较芪黄煎剂组SS较术前明升高(P≤0.001).MOT、GAS下降及GIP上升不明显(P=0.325、P=0.243、P=0.104);组间比较,与对照组比较,芪黄煎剂组术后3、7、14天GAS上升明显和VIP、SS下降明显(P=0.012、P=0.020、P=0.001和P=0.006、P=0.025、P≤0.001;P=0.015、P≤0.001、P≤0.001);术后7、14天MOT上升明显和GIP下降明显(P≤0.001、P≤0.001和P≤0.001、P=0.005),术后14天CCK上升明显(P≤0.001)。3.2动物实验结果3.2.1 RT-PCR检测Ach E、SP、VIP、n NOS、M3R、VIP2R、NK1R的m RNA表达:(1)与假手术组比较,芪黄煎剂组ACh E、SP、M3R及NK1R m RNA转录降低明显(P=0.001,P=0.003,P=0.001,P<0.001),VIP、NOS及VIP2R上升明显(P=0.039,P=0.015,P=0.006);与标准肠内营养组、免疫肠内营养组比较,芪黄煎剂组ACh E、SP、M3R及NK1R m RNA转录升高明显(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.001和P<0.001,P=0.001,P=0.017,P<0.001),VIP、VIP2R下降明显(P<0.001,P=0.042,P<0.001,P=0.046),而NOS下降不明显(P>0.05);(2)与假手术组比较,标准肠内营养组ACh E、SP、M3R及NK1R m RNA转录降低明显(P<0.001,P<0.001,P<0.001,P<0.001),VIP、NOS及VIP2R上升明显(P<0.001,P<0.001,P<0.001)。3.2.2 Western Blot检测Ach E、SP、VIP、n NOS、M3R、VIP2R、NK1R的蛋白表达:(1)与假手术组比较,芪黄煎剂组SP、M3R蛋白的表达明显下降(P<0.001、P<0.001),ACh E、NK1R蛋白表达下降不明显(P=0.140、P=0.052),VIP、NOS和VIP蛋白的表达明显上升(P<0.001、P<0.001和P=0.001)。与标准肠内营养组及免疫肠内营养组比较,芪黄煎剂组ACh E、SP、M3R、NK1R蛋白的表达明显升高(P<0.001、P<0.001、P<0.001、P<0.001及P<0.001、P<0.001、P<0.001、P<0.001);而VIP、NOS和VIP2R明显降低(P<0.001、P<0.001、P<0.001及P=0.021、P=0.002、P=0.009);(2)与假手术组比较,标准肠内营养组ACh E、SP、M3R、NK1R蛋白表达明显降低(P<0.001、P<0.001、P<0.001、P<0.001),VIP、NOS和VIP2R明显升高(P<0.001、P<0.001、P<0.001)。4.结论4.1芪黄煎剂促进胃癌术后胃肠运动功能恢复和调节胃肠激素的分泌。4.2胃肠运动的机制受神经递质调控(促进胃肠运动神经递质和抑制胃肠运动的神经递质平衡),腹腔手术应激提高抑制胃肠运动的神经递质水平,降低促进胃肠运动的神经递质的水平,芪黄煎剂则不仅可降低手术应激对胃肠功能影响,而且降低抑制胃肠运动神经递质水平,提高促进胃肠运动的神经递质水平。