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目的:检测Claudin-1蛋白在食管鳞癌组织中的表达情況,并探讨其在食管鳞癌对癌细胞的凋亡和细胞自噬的影响。方法:1.采用western blot和免疫组化SP法检测食管鳞癌TE-1,KYSE150,及EC9706等3组细胞株Claudin-1蛋白的表达情况。2.用免疫组化SP方法测定并比较Claudin-1蛋白在食管鳞癌癌旁组织和食管鳞癌组织中的表达情况。3.SiRNA干扰Claudin-1蛋白的表达,Western blot检测siR-Claudin-1组Claudin-1表达水平,并评估其干扰作用,选出干扰效果最好的组。4.用流式细胞仪分析siR-Claudin-1组与siR-NC组的凋亡情况,比较凋亡率的改变分析Claudin-1对细胞凋亡的影响。5.电镜下观察食管鳞癌细胞siR-Claudin-1组及siRNC组的自噬,定性自噬的存在。6.Western blot检测siR-Claudin-1组与siR-NC组LC3-Ⅰ及LC3-Ⅱ,并分析比较LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值变化。6.用RFP-GFP-LC3双荧光标记食管鳞细胞siR-Claudin-1组与siR-NC组,激光共聚焦观察两组细胞自噬,观察并比较自噬体及自噬溶酶体变化,结果:1.Western blot、免疫组化检测食管鳞癌3组EC9706,TE-1,KYSE150细胞株,其中KYSE 150的Claudin-1蛋白表达量最高,其中kyse150余EC9706之间差异有统计学意义(p<0.05),Kyse150与TE-1之间无统计学差异(p>0.05),TE-1与EC9706之间有统计学意义(P<0.05),故采用KYSE150细胞株进行后续试验。2.免疫组化显示出Claudin-1蛋白在食管鳞癌癌旁组织少量表达,而在食管鳞癌组织中Claudin-1的表达量显著比食管鳞癌癌旁细胞高(P<0.05)。3.Si-RNA转染3组Kyse-150细胞株后,western检测干扰效果最好的。4.流式细胞仪结果显示Claudin-1能有效抑制食管鳞癌细胞的凋亡率。5.Western blot检测,siR-Claudin-1组与siR-NC组LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值,其中siR-Claudin-1比值低于siR-NC组,说明干扰Claudin-1后对细胞的抑制作用。6.激光共聚焦观察细胞自噬过程,其中siR-Claudin-1组细胞的自噬体及自噬溶酶体数量明显低于siR-NC组。结论:1.Claudin-1蛋白在人食管鳞癌癌旁组织及癌组织中均有表达,主要表达在细胞膜和细胞质中,且食管癌组织比较于癌旁组织表达明显上调。2.Claudin-1蛋白的表达对食管鳞癌细胞凋亡起到抑制作用。3.Claudin-1蛋白的表达促进食管鳞癌细胞的自噬发生。