稻瘟病菌中调控碳代谢阻遏的若干因子分析

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稻瘟病菌(Pyricularia oryzae Sny.Magnaporthe oryzae)引起的稻瘟病是影响粮食生产的主要病害之一,而其单倍体、基因组全序列已测出以及典型的侵染循环等特点使之成为研究植物病原真菌与寄主互作较为理想的模式生物。碳代谢物阻遏(carbon catabolite repression,CCR)广泛地存在于各种真菌中,环境信号可以激发CCR,从而调控真菌的生长、发育和致病能力,但是通过CCR探究植物与病原真菌的互作关系目前还是较为新颖的切入点。CreA/Cre1是丝状子囊真菌中调控CCR的重要转录因子,是酿酒酵母Mig1的同源物。而与酿酒酵母相比,丝状真菌的CCR调控网络更为复杂,以构巢曲霉为例,除了有CreA这一重要的转录因子外,还存在CreB、CreC、CreD等重要的碳代谢因子。我们实验室之前的研究发现,稻瘟病菌的MoCreA、MoCreC参与CCR,且MoCREA、MoCREC基因的缺失突变体的致病力下降。但是,目前关于稻瘟病菌中碳代谢阻遏的调控网络及其致病机制尚不清晰,需要进一步探究完善。因此,本论文在前期研究的基础上,进一步分析了稻瘟病菌碳代谢调控因子MoCreB、MoUbp8(MoCreB同源物)和MoCreD的功能,并对可能参与CCR的组蛋白转录调控因子3(histone transcriptional regulation factor 3,Hir3)进行了研究。同时,通过免疫共沉淀技术筛选了MoCreA的互作蛋白。结果显示,MoCreB、MoUbp8、MoCreD和MoHir3都参与CCR,且参与泛素化酶活性的MoCreD与去泛素化酶MoUbp8具有相反的功能,且可能共同维持稻瘟病菌细胞内部稳态平衡;通过对MoHIR3的反向遗传学分析发现,MoHir3在稻瘟病菌的营养生长、附着胞形成和毒力等方面发挥重要作用;此外,筛选出137个可能与MoCreA互作的候选蛋白。综上,本研究进一步明确了稻瘟病菌中碳代谢调控因子的功能,并为MoCreA碳代谢调控网络的深入探究奠定了基础。
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