Ras基因是一类重要的原癌基因,从裂殖酵母到人类等高等动物普遍存在。Ras蛋白是一种小G蛋白,在各种信号分子的作用下,对细胞的生长、增殖进行调控。　　 Bombyx mori ras oncoprotein(Bras1)是Ras超家族在昆虫中的一个成员。从本实验室家蚕基因库中筛选得到Bras1基因的cDNA序列,GenBank登录号为NM_001043508。利用生物信息学方法对此序列进行分析表明:Bras1的cDNA序列全长1459 bp,含有1个579 bp的开放阅读框(ORF),编码192个氨基酸残基。构建含有Bras1片段的pET-28a的重组质粒;将鉴定正确的pET-28a重组质粒转入感受态BL21(DE3)中,筛选阳性克隆,诱导工程菌表达目的蛋白;用Ni柱亲和层析纯化后得到纯的融合Bras1蛋白;用铁钼法测定其水解GTP的能力,试验结果表明本实验纯化的融合Bras1蛋白具有水解GTP的能力,有一定的GTP酶活性。以纯化的融合蛋白为抗原,免疫雄性新西兰大白兔制备多克隆抗体,ELISA检测多克隆抗体的效价可达到1∶6400以上。提取家蚕各时期和五龄幼虫各组织的蛋白,用于Western blot实验。结果表明:Bras1在头部,丝腺、马氏管和生殖腺中存在表达;在各个发育时期,幼虫的表达量较低,在其他发育时期的表达量都很高。亚细胞定位结果表明,该蛋白主要存在于细胞质中,一部分和细胞膜结合;在用美伐他汀干扰Bras1蛋白的膜结合能力后,发现破坏其与膜的结合能力对家蚕BmN细胞的增殖有一定的抑制作用。研究结果为进一步探讨Bras1在家蚕生长发育过程尤其是变态发育过程中的生物学功能打下了基础。