脂肪酶的固定化及其在固定床反应器中拆分外消旋酮基布洛芬的研究

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本文在比较芸苔丝孢酵母酯酶、Lipase OF粗酶及其纯化组分L2对酮基布洛芬酯的催化拆分效果后,确定催化活性和对映选择性均较高的Lipase OF粗酶作为固定化和反应器构建的酶源.考察了共价结合、交联和吸附等酶固定化方法,从中筛选出酶活回收和产物对映体选择性最高的硅胶作为吸附固定化的载体,并优化确定了固定化的条件:每0.5 g载体加入10 ml酶液(含Lipase OF粗酶10 mg/ml,pH 2.5),在25℃吸附固定10 h.用硅胶作为吸附载体,酶的活力回收达到37%,产物对映体过量值达到98%.通过考察各种有机溶剂对固定化酶的失活作用,选择对酶失活作用最小的氯仿作为反应结束后的洗涤剂.
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