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贝类体内的神经肽和细胞因子等对其免疫防御起着重要的调节作用。强啡肽(Dynorphin DYN)是一种阿片神经肽。随着阿片肽及其受体功能的研究,人们发现阿片肽对心血管系统、消化系统、呼吸系统等都有重要的调节作用。而有关DYN对扁玉螺(Neverita didyma)的免疫调节作用的研究还未见报道。本文采用免疫组化方法对DYN、K、6和μ受体在扁玉螺各器官组织中的分布进行了研究,采用生化方法研究了DYN对血淋巴中部分免疫因子的影响,为贝类免疫学研究积累资料。
免疫组化定位结果表明,在扁玉螺的侧足神经节、脏神经节、口球上皮组织、触角突起、外套膜外上皮及结缔组织、足的上皮组织、食道腺实质细胞、胃及直肠内褶皱处的粘液细胞、肝脏实质细胞、肾实质细胞、心脏内心肌细胞和鳃的支持细胞中检测到大量的DYN。在扁玉螺的侧足神经节、脏神经节、口球上皮组织、触角突起、外套膜外上皮及结缔组织、足的上皮组织、食道腺实质细胞、直肠内的粘液细胞、肝脏实质细胞、肾实质细胞、心脏内心肌细胞、鳃的支持细胞呼吸上皮区检测到了呈不同阳性反应的k受体。在扁玉螺的口球、触角、外套膜和足、消化道与消化腺、肾、心脏及鳃中发现的呈DYN及k受体不同阳性反应的颗粒、细胞或纤维,表明DYN分子有可能通过与分布于这些组织中的k受体相结合,参与了对扁玉螺的摄食过程、感觉功能、免疫防御、运动功能以及消化、排泄、循环和呼吸等功能的调节。此外,在扁玉螺的侧足神经节、脏神经节、口球和触角中均有呈不同阳性反应的μ受体和δ受体的神经纤维和神经细胞的存在,在扁玉螺的消化道与消化腺、心脏、肾脏和外套膜中检测到了μ受体和δ受体的存在,在扁玉螺的足和鳃中检测到了δ受体的存在,在扁玉螺的胃中检测到了μ受体的存在。μ、δ受体在神经组织的分布,有可能表明除DYN之外,内啡肽(Endorphin END)与脑啡肽(Enkephalin ENK)等阿片神经肽也参与了扁玉螺的神经调节。而μ、δ受体在扁玉螺的消化系统、呼吸系统、循环系统和排泄系统的分布,可能表明除DYN之外的END与ENK等阿片神经肽也参与了对扁玉螺的消化、呼吸、循环及排泄功能的调节。
生化测定结果表明,(1)在DYN浓度为1.00 μg/ml和10.00μg/ml的范围内,扁玉螺血淋巴中酸性磷酸酶(ACP)的活力随DYN浓度的升高而增大。(2)在DYN浓度为1.00 μg/ml和10.00 μg/ml的范围内,扁玉螺血淋巴中碱性磷酸酶(AKP)的活力随DYN浓度的升高而增大。(3)当DYN浓度为1.00 μg/ml时,能提高扁玉螺血淋巴中非特异性酯酶(NSE)的活力;而当DYN浓度为5.00μg/ml和10.00μg/ml时,均降低了扁玉螺血淋巴中NSE的活力,且在DYN浓度为5.00μg/ml和10.00 μg/ml范围内,扁玉螺血淋巴中NSE的活力随DYN浓度的升高而降低。(4)当:DYN浓度为1.00 μg/ml和5.00μg/ml时,均能提高扁玉螺血淋巴中髓过氧化物酶(MPO)的活力,且在DYN浓度为1.00μg/ml和5.00μg/ml范围内,扁玉螺血淋巴中MPO的活力随DYN浓度的升高而增大;而当DYN浓度为10.00 μg/ml时,则降低了扁玉螺血淋巴中MPO的活力。(5)当DYN浓度为1.00 μg/ml和5.00μg/ml时,均能提高扁玉螺血淋巴中一氧化氮(NO)的含量,且在DYN浓度为1.00 μg/ml和5.00 μg/ml范围内,扁玉螺血淋巴中NO的含量随DYN浓度的升高而增大;而当DYN浓度为10.00 μg/ml时,则降低了扁玉螺血淋巴中NO的含量。(6)当DYN浓度为1.00μg/ml和5.00μg/ml时,均能提高扁玉螺血淋巴中过氧化氢(H<,2>O<,2>)的含量,且在DYN浓度为1.00 μg/ml和5.00 μg/ml范围内,扁玉螺血淋巴中H<,2>O<,2>的含量随DYN浓度的升高而增大;而当DYN浓度为10.00 μg/ml时,则降低了扁玉螺血淋巴中H<,2>O<,2>的含量。由生化结果可知,低浓度的DYN能通过增强扁玉螺血淋巴中ACP、AKP、NSE以及MPO的活力,提高扁玉螺血淋巴中NO和H<,2>O<,2>的含量对扁玉螺的免疫反应起到了正向调节作用,较高浓度的DYN则通过增强扁玉螺血淋巴中ACP和AKP活力,降低NSE和MPO的活力以及NO和H<,2>O<,2>的含量对扁玉螺的免疫反应进行调节。总之,DYN对扁玉螺的免疫反应起到了十分重要的调节作用,其作用机制可能是通过与血细胞表面的受体结合而起作用的。