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目的：探讨阻断Hedgehog信号通路对转化生长因子-β1（Transforming growth factor-β1，TGF-β1)诱导非小细胞肺癌(Non-smallcell lung cancer, NSCLC)上皮间质转化（Epithelial-MesenchymalTransition, EMT）的影响。方法：1采用TGF-β1（1、5和10ng/ml)诱导肺腺癌A549细胞48h，倒置显微镜观察A549细胞株形态学变化，荧光定量PCR检测Gli1mRNA的表达水平，Western blotting检测Gli1、Vimentin和E-cadherin的表达水平，细胞免疫荧光方法检测Gli1蛋白表达量的变化。划痕实验检测A549细胞株迁徙能力的变化。2采用5ng/ml TGF-β1诱导非小细胞肺癌H460和SK-MES-1细胞48h，荧光定量PCR检测两种细胞中Gli1mRNA的表达水平，Westernblotting检测Gli1、E-cadherin和Vimentin的表达水平，Transwell小室侵袭实验检测侵袭能力的变化。3分别采用Cyclopamine和GANT61特异性阻断A549细胞Hedgehog信号通路中的信号转导因子Smoothened(Smo)及Humanglioma-associated oncogene homolog1（Gli1），24h后，加入终浓度为5ng/ml的TGF-β1诱导48h,荧光定量PCR检测Gli1mRNA的表达水平，Western blotting检测Gli1、Vimentin和E-cadherin的表达水平，细胞免疫荧光方法检测Vimentin和E-cadherin蛋白表达量的变化。Transwell小室侵袭实验检测侵袭能力的变化。4以Gli1siRNA转染A549细胞，8h后，加入5ng/ml的TGF-β1诱导48h,荧光定量PCR检测Gli1mRNA的表达水平，Western blotting及细胞免疫荧光方法检测Gli1、Vimentin和E-cadherin的表达水平，Transwell小室侵袭和迁移实验检测侵袭及迁移能力的变化。5采用GANT61特异性阻断H460和SK-MES-1细胞Gli1，24h后，加入5ng/ml的TGF-β1诱导48h,荧光定量PCR检测Gli1mRNA的表达水平，Western blotting检测Gli1、E-cadherin和Vimentin的表达水平，Transwell小室侵袭实验检测侵袭能力的变化。结果：1倒置显微镜下观察经TGF-β1诱导48h后的A549细胞形态发生了明显的改变，Western blotting检测显示随着TGF-β1药物浓度的升高，各组NSCLC细胞中上皮细胞标志物E-cadherin表达明显减弱，而间质细胞标志物Vimentin表达明显上升。细胞划痕实验检测结果显示TGF-β1诱导后A549细胞迁移能力增强，Transwell小室侵袭实验检测结果显示TGF-β1诱导后H460和SK-MES-1细胞株侵袭能力增加。2荧光定量PCR和Western blotting检测结果均表明在TGF-β1诱导NSCLC发生EMT的过程中皆伴随着Hedgehog信号通路下游效应因子Gli1mRNA及蛋白的高表达，细胞免疫荧光检测也证实了相同的结果。3通过siRNA和药物Cyclopamine及GANT61特异性阻断NSCLC细胞Smo及Gli124h后，各组分别加入终质量浓度为5ng/mL的TGF-β1进行诱导。荧光定量PCR、Western blotting或细胞免疫荧光检测结果显示siRNA和药物均显著抑制Gli1mRNA及蛋白的表达。Western blotting检测结果显示，siRNA和药物干预后的NSCLC细胞中Vimentin蛋白表达明显减弱，而上皮细胞标记蛋白E-cadherin表达明显增多，细胞免疫荧光检测显示了相同的结果。Transwell小室侵袭和迁移实验结果显示，siRNA和药物干预后的NSCLC细胞株侵袭和迁移的能力明显下降。结论：特异性阻断Hedgehog信号通路可以抑制TGF-β1诱导NSCLC细胞EMT的产生，提示Hedgehog信号通路在NSCLC细胞EMT的产生中起重要作用。