康莱特注射液与环磷酰胺联合用药对小鼠Lewis肺癌端粒酶与Survivin表达作用的实验研究

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[目的]康莱特注射液作为抗肿瘤的中药制剂,在临床上被广泛使用。本次实验是将康莱特注射液与化疗药物环磷酰胺(CTX)合用研究肺癌端粒酶活性和Survivin的表达,探讨康莱特注射液抑癌抗癌的作用机理,以及中西医结合治疗包括肺癌在内的肿瘤的研究进展,为临床治疗肺癌和指导用药提供可靠的实验依据。[方法]选择48只SPF级C57小鼠用来复制Lewis肺癌模型后,随机分为4组即荷瘤对照组、康莱特组、环磷酰胺组、康莱特与环磷酰胺联合用药组。荷瘤对照组每日腹腔注射0.9%Nacl注射液,每三日注射两次。康莱特组与联合用药组每日注射康莱特注射液,环磷酰胺组与联合用药组每三日注射环磷酰胺一次,并观察小鼠每日生理状况以及测量饮水饮食量。小鼠Lewis肺癌模型于12d后断颈处死,取肿瘤标本,称瘤重及计算抑瘤率。TRAP实时定量法检测端粒酶活性,免疫组化SABC法检测Survivin阳性表达,并对瘤组织进行病理学的检查。[结果]1.首先确认造模成功,既在肺癌模型接种后六天,移植肿瘤部位能触摸到米粒样肿瘤包块,随机选取两只,取出肿瘤进行镜下病理学观察确认。2.端粒酶活性检测:荷瘤对照组端粒酶活性Ct值为(19.79±1.80),康莱特组端粒酶活性Ct值为(25.51±2.42), CTX组端粒酶活性Ct值为(28.69±1.16),联合用药组端粒酶活性Ct值为(33.46±1.85),各实验组间,差异均具有统计学意义(P<0.01)。联合用药组端粒酶活性Ct值最大端粒酶的活性最小,CTX组Ct值大于康莱特组,而荷瘤对照组的端粒酶Ct值最小。3. Survivin表达检测:Survivin LI平均值分别为荷瘤对照组(0.48±0.03);康莱特组(0.27±0.03);CTX组(0.22±0.03);联合用药组(0.13±0.04)。相对于荷瘤对照组,三组治疗组Survivin LI平均值显著降低,差异具有统计学意义(P <0.01);联合用药组相对于两组单独用药组,Survivin LI平均值降低,差异有统计学意义(P <0.01);CTX组与康莱特组相比,Survivin LI平均值降低,差异具有统计学意义(P <0.01)。4.瘤重与抑瘤率:治疗组的平均瘤重均低于对照组,差异具有统计学意义(P<0.01);各治疗组组间的比较,联合用药组的平均瘤重要明显低于康莱特组和CTX组,差异具有统计学意义(P<0.01),CTX组的平均瘤重低于康莱特组,差异具有统计学意义(P<0.05)。抑瘤率为联合用药组抑瘤作用最强,抑瘤率为66.54%;CTX组次之,抑瘤率为47.58%;康莱特组较弱,抑瘤率为36.86%。5.肿瘤病理的镜下观察:治疗组相对于荷瘤对照组,肿瘤细胞坏死区域增多,多呈片状,密度相对减低,细胞的异型性减少,病理性核分裂像有所下降,而治疗组之间相比较联合用药组最为明显,CTX组比康莱特组明显。[结论]1.康莱特注射液能够抑制小鼠Lewis肺癌端粒酶活性的表达,与环磷酰胺联合应用时对小鼠Lewis肺癌端粒酶活性表达的抑制效果更为显著。2.康莱特注射液能够降低小鼠Lewis肺癌Survivin蛋白的表达,与环磷酰胺联合应用时对小鼠Lewis肺癌Survivin蛋白的抑制效果更为显著。3.康莱特注射液能够降低小鼠Lewis肺癌肿瘤的瘤重并能够抑制肿瘤的生长,与环磷酰胺联合应用时抑瘤效果更为显著。4.康莱特注射液抑制小鼠Lewis肺癌的作用明显,与环磷酰胺联合应用具有显著的协同增效作用。
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