白术、铁皮石斛和杭白菊6种病害的病原鉴定与防治初探

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中药材是浙江省的十大农业主导产业之一,基本形成了白术、杭白菊等“浙八味”道地药材和铁皮石斛等名贵药材的优势产区,是农民增收的重要经济来源。但病害基础性研究薄弱,登记农药产品少及质量安全体系滞后,导致了农药残留和食品安全问题成为制约行业发展的关键因子之一,因此弄清楚病害发生、危害和规律,对中药材的生产变得尤为重要。本研究从浙江省白术、杭白菊和铁皮石斛主产区采集病害样品,通过病原菌分离、致病性试验,综合形态学和分子系统发育分析对病原菌进行了分离、鉴定,并初步研究了其防治。明确了白术立枯病病原为立枯丝核菌(Rhizoctonia solani),对噻呋酰胺和咯菌腈的敏感性最高,EC50值均为0.06μg·mL-1;白绢病病原为齐整小核菌(Sclerotium rolfsii),对吡唑醚菌酯敏感性最高,EC50值为0.02μg·mL-1。白术叶斑病病原为Phoma exigua,对叶斑病菌生物学特性测定表明:该菌菌丝生长的最适温度为28℃,最适pH为8;不同碳源与氮源对其菌丝生长的影响差异显著,其中可溶性淀粉和蛋白胨分别为最适碳源与氮源;当温度为24℃、相对湿度为100%时,最适于分生孢子萌发;菌丝和分生孢子的致死温度分别为47℃和54℃;药剂敏感性测定结果表明:孢子对吡唑醚菌酯的敏感性最高,EC50值为0.10μg·mL-1;在离体条件下,对活性较强的杀菌剂进行了防效筛选,结果表明:吡唑醚菌酯8.5μg·mL-1浓度药液对叶斑病的离体叶片保护效果达到100%。铁皮石斛黑斑病菌为细极链格孢(Alternaria tenuissima),对咯菌腈的菌丝敏感性最高,EC50值为0.10μg·mL-1;杀菌剂防效筛选结果表明:苯醚甲环唑2.8μg·mL-1浓度药液对黑斑病的离体叶片保护效果为49.28%。铁皮石斛炭疽病病原为茶树炭疽(Colletotrichum fructicola),对咪鲜胺的菌丝敏感性最高,EC50值为0.02μg·mL-1;杀菌剂防效筛选结果表明:苯醚甲环唑4.8μg·mL-1浓度药液对炭疽病的离体叶片保护效果为42.00%。杭白菊叶枯病病菌为Phoma bellidis,为研究田间叶枯病菌对多菌灵的抗性程度,采用区分剂量法检测了34株杭白菊叶枯病菌对多菌灵的抗药性,并对不同表现型病菌的β-tubulin基因进行分析比较。结果显示:杭白菊叶枯病菌对多菌灵的抗性频率高达93.94%,且均为高水平抗性,分子机制为β-tubulin基因第198位发生突变(E198A)。同时,采用菌丝生长速率法,测定了叶枯病菌对吡唑醚菌酯的敏感性,结果表明:叶枯病菌群体对吡唑醚菌酯的敏感性差异较大,其中33株菌株EC50值在0.0600.370μg·mL-1之间,呈连续正态分布,平均EC50值为0.177μg·mL-1,即为桐乡杭白菊叶枯病菌群体对吡唑醚菌酯的敏感基线。
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