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目的检测免疫相关性血细胞减少(immuno-related Immuno-related hemtocytopenia,IRH)患者骨髓造血细胞膜上抗体免疫球蛋白G(immunoglobulin G,IgG)亚型,检测骨髓上清IgG各亚型含量,探索IRH患者IgG的优势亚型,为进一步揭示IRH患者的发病机制提供理论上的依据。方法1.研究对象为初治IRH患者(实验组),以意义未名的血细胞减少症患者(ICUS)及正常人分别为病例对照组及正常对照组,进行以下研究分析:(1)采用流式细胞术(FCM)检测IRH患者骨髓细胞(CDl5+、CD34+及GlycoA+细胞)膜抗体(IgM、IgG);(2)FCM检测IgG(+)的IRH患者及正常人(CDl5+及GlycoA+细胞)膜抗体(IgG1、IgG3);(3)采用免疫组化方法(IHC)对Ig G(+)的IRH患者,ICUS组及正常对照组骨髓有核细胞进行IgG亚型(IgG1、IgG2、IgG3、IgG4)染色。2.选取骨髓造血细胞膜抗体IgG阳性初治IRH患者为实验组,以IRH缓解病人、ICUS初治病人及正常人分别为病例及正常对照组,进行下述研究:(1)采用流式微球捕获技术(CBA)对骨髓上清IgG亚型(IgG1,IgG2,IgG3,IgG4)含量进行检测;(2)采用FCM对外周血CD5+CD19+/CD19+比例进行检测;(3)RT-PCR的方法检测外周血淋巴细胞IgG1的mRNA表达。结果1.IRH患者骨髓造血细胞膜抗体IgG阳性率58.69%(27/46)明显高于病例对照组0%及正常对照组0%,骨髓造血细胞膜抗体IgM阳性率80.43%(37/46)。2.实验组CD15+细胞IgG1的阳性率明显高于正常人((3.13±1.80)%vs(0.87±0.38)%),P〈0.05);实验组CD15+细胞IgG3的阳性率明显高于正常人((2.73±2.09)%vs(0.72±0.42)%,P〈0.05);实验组GlyCoA+细胞IgG1的阳性率明显高于正常人((3.97±2.21)%vs(0.87±0.41)%,P〈0.05);实验组GlyCoA+细胞IgG3的阳性率明显高于正常人((2.24±1.82)%vs(0.71±0.50)%,P〈0.05)。3.应用免疫组化方法分别对实验组,ICUS患者及正常人骨髓有核细胞进行IgG亚型(IgG1,IgG2,IgG3,IgG4)免疫组化染色,11/15名IRH患者计数100个有核细胞IgG1阳性细胞≥3个,在ICUS患者及正常人骨髓有核细胞涂片染色中IgG1阳性细胞未见,对上述三组患者骨髓有核细胞涂片进行IgG2,IgG3,IgG4免疫组化染色,阳性细胞未见。4.应用CBA方法对实验组、IRH恢复病人、正常人及ICUS患者骨髓上清IgG亚型(IgG1,IgG2,IgG3,IgG4)进行检测。IRH组IgG1(6998.51±2498.38)mg/L明显高于IRH恢复组((4702.27±1235.25)mg/L,P〈0.01)正常对照组((5613.20±1640.93)mg/L,P〈0.05)和ICUS组((5166.20±1761.64)mg/L,P〈0.01)。IRH组IgG3(637.63±252.93)mg/L明显高于IRH恢复组((415.47±196.60)mg/L,P〈0.01)正常对照组((422.85±212.69)mg/L,P〈0.05)和ICUS组((485.70±197.29)mg/L,P〈0.05)。IgG2四组比较无统计学意义,IgG4四组比较无统计学意义。IRH组IgG((10903.29±2576.10)mg/L)明显高于IRH恢复组((8468.27±1957.58)mg/L,P〈0.05)。5.实验组CD5+CD19+/CD19+明显高于正常对照组及ICUS组((23.34±9.36)%)vs(13.67±5.10)%vs(12.40±3.63)%(P<0.01),实验组CD5+CD19+/CD19+与骨髓上清IgG1水平呈明显正相关关系(r=0.392,P=0.043)。6.实验组,骨髓上清IgG1水平与中性粒细胞绝对值呈明显负相关关系(r=-0.459,P=0.016);骨髓上清IgG3水平与血红蛋白成明显负相关关系(r=-0.389,P=0.045)。7.外周血淋巴细胞IgG1基因相对表达量在实验组,恢复组,正常对照组分别为((5.27±4.83)vs(2.32±2.03)vs(1.58±1.50)),实验组明显高于正常对照组(P〈0.05〉,恢复组与正常对照组比较无统计学意义。结论1.IRH患者的骨髓造血细胞膜上可检测到IgG抗体。通过流式细胞学方法检测到骨髓造血膜抗体IgG阳性组CD15+及GlyCoA+细胞膜抗体IgG1及IgG3升高明显,免疫组化法证实IRH患者骨髓细胞膜抗体IgG亚型以IgG1为主,提示在IRH中破坏造血的IgG亚型可能为IgG1及IgG3。2.BMMNC-Ab IgG阳性患者骨髓上清IgG1与IgG3升高明显,IgG1与CD5+CD19+/CD19+比例呈明显正相关关系,IgG1与患者白细胞呈负相关关系,IgG3与患者血红蛋白呈明显负相关关系。通过RT-PCR方法证实IRH患者外周血淋巴细胞IgG1 mRNA相对表达量较正常对照组增高。以上提示IRH患者IgG1生成增多,且为血细胞破坏的主要因素。