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沙门氏菌和大肠杆菌是常见的食源性病原菌,广泛存在于受污染的肉制品和乳制品等动物性食品中,常常引发食源性疾病。噬菌体能特异性裂解宿主细菌,且具有易获得、成本低、无毒、对环境友好等特点,是控制食源性污染的一种非常具有前景的方法。电化学生物传感器作为一种快速、灵敏、简便、成本低廉的检测方法已经得到广泛的研究,基于噬菌体的电化学生物传感器是一种新型的病原菌检测方法,在检测与监控病原微生物方面具有良好的应用潜力。本研究从广西南宁某猪场污水中分离筛选到一种多价广谱裂解性噬菌体,命名为Tequatrovirus EP01。噬菌体EP01在双层琼脂平板上能形成大小一致、清澈透亮、边缘整齐无晕圈的噬菌斑;EP01宿主范围广,能够同时裂解1株肠炎沙门氏菌和31株不同来源不同血清型的大肠杆菌;EP01潜伏期为10 min,爆发量为80 PFU/cell,在p H 4～10、温度30～60℃的条件下可保持相对稳定,80℃培养30 min仍能检测到活的噬菌体的存在;EP01属于肌尾病毒科、T4样病毒属,基因组大小为165577 bp（Genbank OM135583.1）,基因组中有12个与受体结合蛋白相关的CDSs,未发现与毒力因子、溶源及耐药有关的基因。本研究在LB液体培养基中测试了EP01对肠炎沙门氏菌GXSM-N02、大肠杆菌O157:H7 GXEC-N07、大肠杆菌O114:K90（B90）GXEC-N01和大肠杆菌O142:K86（B）GXEC-N11的抑制作用。结果显示,EP01能够显著减少所有受试菌株的数量。进一步对EP01在人工污染的猪肉表面和牛奶中的杀菌效果进行评估,结果显示,EP01显著降低了所有受试菌株的活菌数(2.18–6.55 log10CFU/样品,p＜0.05)。用EP01处理后观察到猪肉表面、牛奶中的活菌数显著减少6.55 log10CFU/cm~2、4.3 log10CFU/m L（p＜0.001）。总的来说,4℃时的抑制效果要比在28℃时更稳定,而在牛奶中观察到相反的结果。MOI为1时的抑菌效果优于MOI为0.001时的抗菌效果。通过体内安全性试验、体内治疗试验对EP01治疗大肠杆菌O157:H7感染雏鸡的效果进行评估。结果显示,注射EP01后,雏鸡健康状态良好且剖检未发现组织器官病变,表明EP01对雏鸡不具有致病性,安全性良好;腹腔注射高效价（1×10~9PFU/m L）的EP01可将感染雏鸡的存活率提高60%,噬菌体治疗组雏鸡肝脏、脾脏、肠道的颜色逐渐恢复正常,坏死和出血症状得到缓解。EP01处理24h后,噬菌体治疗组雏鸡的肝脏、脾脏、肠道细菌数量显著降低了1.29–3.56个数量级（p＜0.01）。表明EP01对感染大肠杆菌O157:H7的雏鸡具有较好的治疗效果。本研究基于EP01高效特异性识别大肠杆菌O157:H7 GXEC-N07的特点,建立了一个用于检测GXEC-N07的噬菌体电化学传感器。由于羧基化氧化石墨烯和导电炭黑具有较大的比表面积和良好的电化学性能,本试验选择羧基化氧化石墨烯来固定EP01、导电炭黑作为电化学信号增强剂,将这两种纳米材料与EP01进行复合滴加在玻碳电极表面经牛血清白蛋白封闭后制成电化学传感器。由于EP01对GXEC-N07具有特异性识别作用,GXEC-N07吸附到传感器表面引发了细胞膜的电子屏蔽效应,阻碍了界面电子传递,导致电化学信号减小,进而实现对GXEC-N07的定量检测。本研究还探索了羧基活化时间、封闭时间、扫描速率对传感器性能的影响,并通过研究噬菌体传感器和GXEC-N07孵育时间的影响,测得了最佳检测条件。在最优条件下,对不同浓度的GXEC-N07进行检测。结果表明羧基化氧化石墨烯能较好地固定噬菌体,导电炭黑具有良好的电子传导能力。噬菌体传感器在大肠杆菌浓度为1×10~2-1×10~7CFU/m L的范围内具有良好的线性关系,线性相关系数为0.97194,检测限为11.8 CFU/m L,整个检测过程可在30 min内完成。最后在牛奶样品中进行实样检测,测得检出回收率为63.3%～114.2%。综上所述,多价广谱噬菌体EP01具有控制食源性大肠杆菌和沙门氏菌,以及治疗动物大肠杆菌感染的潜力,在动物性食品安全和噬菌体治疗方面具有良好的应用前景。基于羧基化氧化石墨烯和导电炭黑构建的噬菌体电化学传感器操作简单、成本低廉、检测时间短、检测限低,抗干扰性强、重现性良好,为食源性病原菌的检测提供了新的思路,具有良好的应用前景。