Ad-BMP-2/BMSCs/DBM对兔股骨头坏死修复的实验研究

来源 :桂林医学院 | 被引量 : 1次 | 上传用户:snowtea1987
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目的:评价腺病毒-骨形态发生蛋白-2/骨髓间充质干细胞/脱钙松质骨(Adenovirus-Bone Morphogenetic Protein-2/Bone Mesenchymal Stem Cells/Demineralized Bone Matrix,Ad-BMP-2/BMSCs/DBM)对兔股骨头坏死的治疗效果,为临床治疗股骨头坏死探索新途径。方法:(1)采用髓芯减压联合液氮冰冻法制备兔股骨头坏死模型;(2)将造模成功的兔子随机分为A、B、C、D四组(n=12),A组不植入任何材料,为造模组,B、C、D分别植入DBM、DBM/BMSCs、BMP-2/BMSCs/DBM;(3)术后4、8、12周各组分别处死4只实验动物,通过X线摄像(X-Ray)技术、Lane-Sandhu X线评分表、大体标本观察、苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-Eosin Staining,HE染色法)、倒置显微镜镜检法、聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)技术、扫描电子显微镜(Scanning Electron Microscope,SEM)、能谱仪(Energy Dispersive Spectroscopy,EDS)检测兔坏死股骨头的X线表现、骨修复评分、大体标本修复情况、骨小梁结构变化、骨小梁空陷细胞率、BMP-2基因表达量、表面微观形貌和钙磷比(Ca/P),以此来评价坏死股骨头的修复情况。结果:X线结果显示A组股骨头塌陷,无明显成骨,B、C、D组股骨头缺损区有骨再生现象,但D组再生情况明显优于B、C两组。Lane-Sandhu X线评分A组<B、C组<D组(P<0.05)。B和C组差异无统计学意义。大体观示A组股骨头塌陷,钻孔存在;B、C组股骨头未塌陷,钻孔存在;D组股骨头未塌陷,钻孔消失。HE染色示A组骨小梁坏死、碎裂,大量空骨陷窝;B、C组可见成骨细胞及新生幼稚骨小梁;D组见大量骨细胞,新生骨小梁与正常骨小梁无异。空骨陷窝率A组>B、C组>D组(P<0.05)。B和C组差异无统计学意义。PCR显示各时间点BMP-2表达量A组<B组<C组<D组(P<0.05)。SEM显示A组未见钙化沉积,B、C组可见钙化沉积及低钙性类骨质,D组新生骨改建成熟,与正常骨组织无差异。EDS显示Ca/P A组<B组<C组<D组,D组Ca/P与正常股骨头Ca/P无显著差异。结论:BMSCs能够向成骨细胞分化,对骨缺损或者骨坏死区域有一定的修复作用;BMP-2具有诱导和促进骨修复的能力;组织工程骨BMP-2/BMSCs/DBM植入体内后能够诱导BMSCs向成骨方向分化,促使兔股骨头坏死区域骨组织的再生和修复,在治疗股骨头坏死方面展现出良好的应用前景。
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